Пцр в гинекологии

Гинекологический мазок в ПЦР-методике

Взятие гинекологического мазка с последующим исследованием его с помощью ПЦР открывает возможности для диагностики инфекций, передаваемых половых путём. Открыто данное исследование было в 80-х годах 20 века. Ученый, разработавший его, получил Нобелевское вознаграждение. Открытие позволяет узнавать возбудителя заболеваний при его минимальной концентрации в половых путях. Высокая точность инновационной ПЦР-диагностики делает её незаменимым исследованием во многих сложных клинических случаях.

Методика исследования

Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в размножении участка ДНК. Порой для возникновения симптомов определённых заболеваний необходима мизерная концентрация бактерий или вирусов. Большинство микробиологических исследований не могут обнаружить патогенные организмы в таком разведении, а тем более их с точностью подсчитать. В таких случаях только и выручает метод активного полимеразного наращивания.

ПЦР-диагностика требует для исследования участок ДНК, который подвергается клонированию. К биологическому материалу добавляют различные реагенты, которые комплиментарно достраиваются к участкам выделенного генетического материала. Многократное преумножение ДНК позволяет определить не только род, но и вид бактериологического или вирусного материала. Уточнение вида возбудителя делает лечение максимально эффективным и этиотропным.

Мазки ПЦР в гинекологии позволяют выделить возбудителей хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза и многих других опасных инфекций. Часто эти заболевания долго существуют в скрытых, латентных формах и долго не проявляются клиническими симптомами. ПЦР позволяет выявить их на ранних стадиях и наиболее своевременно начать лечение.

Среди явных преимуществ полимеразной реакции выделены:

1. Высокая точность определения природы патогенного микроорганизма.
2. Возможность выделения вируса или бактерии при мизерных их концентрациях в биологическом материале.
3. Анализы проводятся достаточно быстро.
4. Заражение некоторыми микроорганизмами можно выявить только с помощью ПЦР. Вирус иммунодефицита также возможно выделить иди подтвердить с помощью данного диагностического мероприятия.

Исследование в гинекологии

В гинекологической практике мазок на ПЦР используется довольно широко. Ведь он позволяет выявить возбудителей большинства воспалительных заболеваний женских половых органов наружной и внутренней локализации. Анализ проводят женщинам, активно живущим половой жизнью, беременным пациенткам и проходящим прегравидарную подготовку.

• Мазок ПЦР на ИППП нередко выявляет не только опасные бактериальные инфекции, но и заражение вирусами герпеса или папилломы человека. Последние и вовсе являются онкогенными провокаторами, излюбленным местом которых является ткань шейки матки.
• ПЦР помогает выявить хламидии у беременных женщин, которые не обследовались на данную инфекцию до зачатия. Бактерия может вызывать различные уродства и пороки развития плода, а также вовсе прекращать его развитие. Носительство хламидий может долгое время не проявляться, быть выявлено лишь во время беременности как причина внутриутробной гибели зародыша. Но и при своевременном обнаружении бактерий у женщин «в положении» предоставляется возможным провести лечение без урона для матери и плода.

Является ошибочным мнение, что взятие мазков ПЦР на ИППП при беременности создает угрозу выкидыша. Соскоб для исследования действительно берут из шейки матки, но таким образом, что не затрагивают растущий эмбрион. К тому же, данная анатомическая область по длине составляет около 4 см вне беременности и несколько уменьшается на поздних сроках гестации. Это позволяет достаточно безопасно взять материал для исследования.

Увеличивают достоверность анализа некоторые простые правила, которые следует соблюдать женщинам перед исследованием:

1. Пациенткам рекомендуется не мочиться 2-3 часа до выполнения соскоба из шейки матки.
2. За день до взятия материала необходимо отменить прием антибактериальных и бактериостатических средств.
3. Вне беременности лучше сдавать мазок в середине менструального цикла. Неблагоприятным периодом считается время до начала менструального кровотечения или сразу после него.
4. 2-3 дня не рекомендуется использовать локальные средства контрацепции или любые другие вагинальные медикаменты.
5. Сутки до исследования нельзя иметь половые отношения.
6. Накануне взятия пробы запрещается принимать душ и обмывать наружные половые органы.
7. Нельзя брать соскоб из шейки матки в тот же день, когда проводилось кольпоскопическое исследование.

Довольно простые рекомендации позволят наиболее точно определить заболевание, передающееся половым путем, по генетическому материалу его возбудителя.

Показания для ПЦР

Полимеразная реакция как метод диагностики представляет собой новый и инновационный способ идентификации микроорганизмов. К его помощи активно прибегают в следующих случаях:

1. При установлении причин бесплодия. Невозможность зачать ребенка часто связана с инфекцией половых органов, которую тяжело распознать обычными способами. Латентное течение многих инфекций определяет склонность к прерыванию беременности, несостоятельности имплантации плодного яйца.
2. При установленной природе инфекционного возбудителя ПЦР проводится для выяснения фазы заболевания: острой или хронической.
3. Мазки ПЦР у женщин берут в случае тяжело протекающих беременностей. Внутриутробные инфекции, приобретенные до беременности и в ее активное течение, вызывают задержку развития и гибель плода. Рождение детей с аномалиями развития заставляет обследовать мать повторно в послеродовом периоде.
4. В ходе диагностической процедуры возможно установить также чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.

Несмотря на кажущуюся сложность, проведение полимеразной реакции продолжатся не более 4 дней. Это время необходимо для построения полноценной молекулы ДНК, которую удается идентифицировать с конкретным микроорганизмом. Взятие биологического материала как субстрата для анализа и вовсе занимает до 5 минут.

Результат ПЦР-метода имеет два варианта интерпретации: позитивный либо негативный:

• Положительный ответ полимеразной реакции подтверждает наличие в материале микробных следов, а также указывает род и вид возбудителя.
• Отрицательный результат говорит о стерильности биологического материала, отсутствии бактерий и вирусных частиц.

На основе расшифровки мазка врач определяется с методикой лечения. Этиотропные антибиотикотерапия или противовирусное лечение позволяют быстро и бесследно очистить микрофлору от возбудителя опасных инфекций. Своевременная диагностика не позволяет навредить и растущему плоду во время беременности матери – при проведении терапевтических курсов эрадикации возбудителей инфекций, передающихся половым путем.

zdorovieledy.ru

ПЦР анализ в лечении гинекологических больных – о принципах проведения и достоверности

Для выбора правильного метода лечения инфекционных заболеваний необходимо установить тип возбудителя. Стандартные мазки и бактериологическое исследование не всегда позволяют выявить инфекцию, а вирусы невозможно получить на питательных средах. Поэтому в гинекологии, в частности, используют ПЦР-анализ, который эффективен на этапе диагностики патологии и контроля лечения.

Полимеразная цепная реакция – это метод молекулярной биохимии, который разработал в 1983 г. американский ученый К. Мюллис. Но его основы заложили еще в 1970 годах норвежские ученые, которые разработали способ построения копий молекул ДНК. Американский ученый доработал метод, что позволило воспроизводить исходную молекулу любого генетического материала при помощи обработки специальным ферментом ДНК-полимеразой. Методика сделала переворот в молекулярной биохимии, а в 1996 году К. Мюллису за изобретение присудили Нобелевскую премию.

Особенности исследования

ПЦР-диагностика отличается от других методов исследования. В искусственных условиях производится копирование небольшого участка нуклеиновой кислоты. Реакция запускается только в случае, если в исследуемом образце есть компонент ДНК, который соответствует заданным условиям.

Создание копии нуклеиновых кислот похоже на аналогичный процесс в живом организме, но в клетках создается полный образец, а ПЦР запускает синтез небольшого короткого сегмента. Длина копируемых оснований в ходе исследования составляет не больше 3000 пар, тогда как у человека – больше 3 млрд пар.

В медицинской практике используются разные типы исследований. Изначально анализ ПЦР на ИППП позволял определить только присутствие патогенных микроорганизмов. В настоящее время разработан количественный анализ ПЦР, или в режиме реального времени, который выявляет изменение присутствия генетического материала в образце. Поэтому в результате отражается число колониеобразующих единиц бактерий или количество вирусов.

Полимеразная цепная реакция в гинекологии применяется для поиска следующих микроорганизмов:

• хламидии;
• уреаплазмы;
• микоплазмы гоминис и гениталиум;
• трихомонады;
• гонококки;
• цитомегаловирус;
• герпес 1 и 2 типа;
• ВПЧ;
• гарднереллы;
• кандиды.

Достоинства и недостатки методики

Полимеразная цепная реакция значительно упрощает диагностику инфекционных заболеваний, которые встречаются у гинекологических больных. К достоинствам исследования относится  его высокая чувствительность. Некоторые заболевания могут иметь скрытый характер, не выявляются при помощи мазка и бактериологии, но протекают с периодическими клиническими проявлениями. Для получения положительного результата достаточно, чтобы в исследуемом материале присутствовало всего несколько фрагментов нуклеиновой кислоты. Высокая чувствительность позволяет выявить вирусные заболевания через короткое время после инфицирования, когда клинические симптомы еще отсутствуют.

Среди других положительных аспектов выделяют следующее:

• для исследования подойдет любой биологический материал;
• комплексность – после взятия одной пробы можно провести обследование на множество микроорганизмов;
• высокая скорость – для получения копии генетического материала достаточно 5-7 часов, поэтому результат исследования выдается на руки в течение суток;
• высокая точность позволяет избежать ложноположительных или ложноотрицательных реакций, которые часто возникают при иммунологическом исследовании из-за перекрестных реакций;
• низкая стоимость реагентов делает исследование доступным для большинства лабораторий и пациентов.

К недостаткам комплексного анализа ПЦР относят высокие требования к получению биологического материала. Образцы должны быть взяты стерильными инструментами, на которых не будет присутствия внешнего загрязнения или других клеток. В помещении, где производят забор анализа, должны быть установлены качественные фильтры, которые очищают воздух на 99,9% от микробов, вирусов и фрагментов ДНК. Иначе результат может быть непредсказуемым.

Какой материал  используют для диагностики

Для обследования на половые инфекции у женщин чаще всего берут мазок из заднего свода влагалища или уретры. Если взять отделяемое из преддверия влагалища, исследование может быть неверным. Большая часть микроорганизмов поселяется в глубине складок слизистой оболочки. На вульве вагинальная микрофлора может смешиваться с микроорганизмами с кожи, а у пациенток, активно использующих гигиенические ежедневные прокладки или носящих трусики-стринги, может присутствовать флора из прямой кишки.

Взятие мазка на ПЦР-анализ

Для исследования реже применяется моча. Диагностика вирусных инфекций проводится по образцу крови.

У женщин, родивших детей с признаками внутриутробной инфекции, после выкидыша, для диагностики может использоваться участок плаценты, материал абортуса.

Показания для обследования

Мазок на ПЦР назначают по определенным показаниям:

1. Определения состава возбудителей при имеющихся клинических проявлениях острой инфекции.
2. Хроническое воспаление половых органов с периодами обострений.
3. Контроль проведенного лечения.

Точность диагностики в комплексном анализе помогает выявить полный спектр возбудителей и подобрать лекарственные препараты. Некоторые микроорганизмы чувствительны к узкому спектру антибиотиков. Например, трихомонады можно вылечить только Метронидазолом. Если его не назначить в составе комбинированной схемы, инфекция перейдет в хроническую форму. Но и превентивное назначение антибиотика плохо влияет на собственную микрофлору, увеличивает риски появления побочных реакций.

ПЦР-диагностика назначается женщинам с эрозией или эктопией шейки матки. Воспалительный процесс экзоцервикса часто связан с инфицированием вирусом папилломы человека. ВПЧ 16, 18, 33 типа относится к высокому онкогенному риску и способен вызвать атипическую трансформацию клеток, которая становится дисплазией и переходит в рак шейки матки. Поэтому необходимо проводить обследование, во время которого определяется тип возбудителя, чтобы строить прогнозы и подбирать лечение.

При постановке на учет по беременности анализ проводится для поиска инфекции, которая может повлиять на вынашивание плода. Обследование назначают при положительных иммунологических тестах, в которых выявляются иммуноглобулины, свидетельствующие о присутствии возбудителя. Воспроизводство копий ДНК уточняет присутствие возбудителя вне зависимости от реакции организма на него.

Беременным необходимо обследование на цитомегаловирус. Первичное инфицирование в период вынашивания ребенка приводит к невынашиванию и тяжелым порокам развития (о том, чем опасен цитомегаловирус во время беременности, мы уже рассказывали).

Подготовка пациентки

Для получения точного результата необходима правильная подготовка к сдаче анализа, которая зависит от типа исследуемого материала.

Кровь для анализа берут из вены строго натощак. Последний прием пищи должен быть вечером, оптимальный промежуток до забора материала должно пройти не менее 8 часов. Плохо влияют на состав крови жирная и острая пища, алкоголь, некоторые лекарственные препараты.

Моча сдается рано утром. Необходимо собрать ее до проведения гигиенических процедур в стерильную тару. В случае сомнительного качества собранной мочи, ее можно собрать при помощи уретрального катетера напрямую из мочевого пузыря.

Для исследования мазка из уретры или влагалища методом ПЦР, необходимо воздержаться от секса в течение нескольких дней. Запрещено проводить спринцевания и другие вмешательства, во время которых произойдет изменение состава флоры. Результат может оказаться неточным. Перед взятием материала нельзя мочиться 2 часа, чтобы не вымыть микроорганизмы струей мочи. Женщинам не берут анализы во время менструации и в течение 2 дней после ее окончания.

Как выполняется ПЦР

То, как берут мазок, мало отличается от обычного забора отделяемого из влагалища. Процедура выполняется на гинекологическом кресле. Диагностика проводится в ближайшее время, но исследуемый материал может сохраняться долгое время.

Сама реакция состоит из нескольких этапов. Ее проводят в специальном приборе – амплификаторе. В нем происходят циклы нагревания и охлаждения с высокой точностью температуры. Чтобы биологический материал не испарялся, к смеси добавляют вазелиновое масло.

Для проведения полимеразной цепной реакции используют следующие компоненты:

• ДНК-матрица, которая содержит участок нуклеиновой кислоты, требующий воспроизведения;
• два праймера – коротких участка нутклеотда, которые нужны для воспроизводства матричной цепочки;
• термостабильный фермент ДНК-полимераза;
• нуклеозидфосфаты;
• магний в состоянии ионов;
• буферный раствор, который обеспечивает необходимую кислотность среды, содержит соли, бычий сывороточный альбумин.

Все исследование проходит в три стадии. Сначала выполняется денатурация. Матрицу ДНК нагревают до 98°С, чтобы ее две цепочки разошлись. Для разогрева достаточно от 30 секунд до 2 минут. Во время денатурации происходит разрушение водородных связей в молекуле, она теряет структуру двойной спирали. В некоторых случаях проводится и предварительный разогрев праймеров. Этот тип исследования называют горячим стартом, он помогает снизить количество побочных продуктов реакции.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

После денатурации запускается отжиг. В это время температуру смеси начинают снижать. Обычно она уменьшается на 4-5°С от исходной. Праймеры присоединяются к одноцепочечной ДНК. Их подбирают с определенным составом, который помогает выделить и отграничить исследуемый участок нуклеиновой кислоты. Эта стадия длится 0,5-2 минуты. Если температура подобрана неверно, праймеры могут не образовать связь с нужным участком молекулы или привязаться в неверном месте и образовать неверные продукты.

Последняя стадия – элонгация. Во время прохождения этого этапа подбирается оптимальная температура, которая подходит для используемой дезоксинуклеотидтрифосфаты. На каждую тысячу пар образующихся оснований нужно около 1 минуты. Этот этап длится 7-10 минут.

Этот цикл повторяется несколько раз.

Сколько по времени делается исследование?

Все зависит от поиска конкретного возбудителя, характера образца и количества искомых инфекций. Для получения ответа необходимо провести не менее 30 полных циклов амплификации, при длительности одного до 15 минут. Поэтому для получения результата нужно до 7 часов, а иногда и больше. Ответ выдается пациенту или отправляется лечащему врачу не позднее, чем через сутки после забора материала.

Результаты анализа и их расшифровка

Что показывает ПЦР-анализ, зависит от цели исследования. При качественном исследовании в бланке указывается наличие или отсутствие ДНК искомого возбудителя. Положительный результат обозначает присутствие инфекции, а отрицательный – отсутствие генетического материала.

Количественное ПЦР позволяет определить в режиме реального времени число молекул ДНК возбудителя. Это необходимо для диагностики условно-патогенных микроорганизмов, которые не требуют лечения в низких концентрациях. Такой подход применяют при диагностике уреа- и микоплазм.

Хламидии

Обследование на различные типы инфекции имеет свои особенности и показания. Анализ ПЦР на хламидии проводят чаще остальных. Это связано с широким распространением инфекции, бессимптомным течением у 60% женщин и большим количеством осложнений при хроническом инфекционном процессе. Обследоваться рекомендуется в следующих случаях:

• острые проявления вульвовагинита неясной этиологии;
• установление причины хронического воспаления половых органов;
• бесплодие;
• контроль эффективности лечения;
• скрининговое обследование.

Скрининг необходим у пациенток из групп риска, чтобы исключить бессимптомное носительство хламидий. Контроль излеченности проводится не ранее, чем через месяц после прохождения курса антибиотикотерапии.

Беременным предварительно проводится ИФА, чтобы определить наличие антител к хламидиям. Это обследование рекомендуется пройти в плане прегравидарной подготовки, чтобы при инфицировании провести лечение до наступления беременности и снизить риски осложнений как от самого возбудителя, так и от приема антибиотиков.

Уреаплазмы

Уреаплазмоз относится к инфекциям, вызванным условно-патогенной микрофлорой. Лечение не проводится при количестве менее, чем 10Х4 КОЕ. Но при наличии клинических проявлений хронического воспаления, которое плохо поддается лечению, беременным назначается антибиотикотерапия. Оптимально пройти исследование на этапе планирования беременности для уменьшения риска для плода. ПЦР на уреаплазмоз относится к обязательным исследованиям при бесплодии.

ВПЧ

Папилломавирусы приводят к появлению предраковых изменений шейки матки, но не все типы обладают таким потенциалом. Высоким онкогенным риском отличаются 16 и 18 типы, несколько ниже 33, 31, 51,52 и другие. А ВПЧ 6, 11, 42 типа становятся причиной остроконечных кондилом и редко обнаруживается в злокачественных опухолях. Анализ необходим при дисплазии шейки матки, входит в пакет скринингового обследования.

Герпес

Для исследования может использоваться не только кровь, но и соскоб со слизистой оболочки половых органов. Обследование проводят:

• при подготовке к беременности;
• диагностированной ВИЧ-инфекции;
• боли при мочеиспускании и отсутствии признаков бактериальной инфекции;
• для дифференциальной диагностики генитальных инфекций.

В крови вирус определяется на 4 сутки после инфицирования. Он относится к хроническим инфекциям, которые могут иметь длительный период ремиссии и находиться в дремлющем состоянии в спинальных ганглиях.

Кандиды

Урогенитальный кандидоз в 15% случаев протекает в хронической форме. Иногда во время появления зуда и жжения в мазке не обнаруживаются клетки гриба или его гифы. Обследование и последующая расшифровка ПЦР-мазка помогает установить грибковую инфекцию. Анализ может определить тип кандид для подбора противогрибкового препарата.

Трихомонады

Одноклеточный микроорганизм не всегда можно обнаружить в мазке, но при этом у женщины будут присутствовать признаки хронического воспаления, ощущение зуда и жжения половых органов. Исследование необходимо при поиске причин бесплодия, цистите, эндометрите неясной этиологии, длительном воспалении.

В гинекологии анализ ПЦР используется в составе комплексной диагностики ИППП. Это достоверный метод определения возбудителя по фрагментам ДНК. Производится забор венозной крови или отделяемого из влагалища. Длительность проведения анализа – сутки.

Часто требуется проверка иммунного ответа организма на инфекцию, по присутствию определенных антител можно установить давность инфицирования  и этап течения болезни, что не позволяет сделать ПЦР.

ginekolog-i-ya.ru

ПЦР у женщин

ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это генетический тест. Позволяет в собранном у пациента материале обнаружить ДНК(РНК) или части ДНК(РНК) инфекционного агента или дезоксирибонуклеазу (рибонуклеазу) самого пациента.

Амплификация – копирование коротких фрагментов ДНК микроорганизма. Осуществляется несколько раз в пределах одного температурного цикла в условиях специализированной лаборатории.

Свойства метода ПЦР:

• высокая точность и чувствительность метода
• специфичность (выделяют ДНК инфекционного агента, ДНК пациента и других микроорганизмов)
• универсальность выполнения лабораторного этапа исследования
• скорость выполнения ПЦР выше, чем при использовании столь же точного культурального метода (от 5 часов до суток)

ПЦР является достаточно точным анализом, используемым при постановке диагноза при любом инфекционном заболевании.

Когда результат трактуется как ложноотрицательный?

Если в крови, моче, мокроте или мазках нет следов возбудителя, так как микроорганизмов в принципе мало, или материал забран с нарушением требований к технике манипуляции. Ложноположительных результатов при выполнении полимеразной цепной реакции не бывает.

ПЦР не зависит от пола пациента, сдававшего данный материал.  Соответственно, по сути, ПЦР у женщин ничем не отличается от ПЦР у мужчин.

Что нужно сдавать на ПЦР

Мазки:

• из мочеиспускательного канала
• из прямой кишки
• со слизистой глаза и нижнего века
• из цервикального канала
• из влагалища
• из зева
• с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.

Применение ПЦР

• диагностика заразных заболеваний, в том числе венерических
• определение генетических заболеваний
• генотипирование, создание генотипического паспорта
• анализ ГМО продуктов и качества продуктов питания
• определение личности
• установление отцовства

На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР

ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.

То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.

Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.

• сифилис
• трихомониаз
• хламидиоз
• микоплазма и уреаплазма
• гонорея
• ВПЧ
• мягкий шанкр
• гарднереллез
• генитальный или иной герпес
• донованоз
• цитомегаловирусная инфекция
• ВИЧ
• вирусные гепатиты
• контагиозный моллюск
• саркома Капоши
• кандидоз
• фтириаз
• чесотка

Когда назначается ПЦР

Имеет значение срок забора материала. Анализ будет информативен уже в продромальном периоде заболевания. В разгар инфекционного процесса результат достигается практически с гарантированной точностью.

Для определения эффективности лечения ПЦР назначают не ранее чем через 30-60 дней по завершении курса антибиотиков.

Технология забора мазка на ПЦР

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

• в день забора материала не мыться, не спринцеваться
• не мочиться минимум за 2 часа до забора
• мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
• накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
• антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на ПЦР у женщин.  Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

• ​мочеиспускательный канал
• цервикальный канал
• стенка влагалища
• ​ампула прямой кишки
• слизистая глаза и нижнее веко
• задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой». Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

Забор мокроты на ПЦР проводится в стерильный контейнер. Предварительно пациенту предлагают выпить побольше жидкости.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Как берут кровь на ПЦР

Для сдачи крови в процедурную надо явиться натощак, накануне допустим только легкий ужин. При анализе методом ПЦР используется кровь из вены, для чего специальной иглой на вакутейнере производят прокол.

После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления (вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой) кровь легко поступает в пробирку.

ПЦР крови на ВИЧ и гепатиты выполняется в реальном времени с определением концентрации ДНК (РНК) в плазме. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду.

Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации. Обычно мазки и моча используются для проведения ПЦР при определении возбудителей ЗППП.

Кровь на ПЦР забирается при постановке диагноза герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ и гепатитов, а также токсоплазмоза.

Мазок на ПЦР из зева или, проще говоря, изо рта – при диагностике мононуклеоза и ЗППП: цитомегаловирус, ВПЧ, сифилис.

Мазок из ануса на ПЦР применяется при определении подавляющего большинства ЗППП.

Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР – определяет врач- венеролог после осмотра.

Хранение и транспортировка ПЦР анализов

Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях – в холодильнике еще 20 часов. Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия.Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию.

Аналитический этап ПЦР диагностики

В лаборатории сперва выделяется ДНК из предоставленного образца.

Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов. Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

Количественная оценка ПЦР или количественный анализ экспрессии генов говорит об их активности. В результате экспрессии генов образуются определенные белки. которые и считаются в рамках количественной ПЦР в реальном времени. По результату этого исследования врач судит об инфекционной нагрузке и активности возбудителей.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

• при ВИЧ
• при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
• при лечении аутоиммунных заболеваний
• в период выздоровления после тяжёлой болезни
• при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

Цена анализа зависит от материала, использованного для ПЦР, и колеблется от 350 до 1200 рублей.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

onvenerolog.ru

Результат анализа пцр в гинекологии

• Непосредственное выявление присутствия возбудителя (а именно, специфического участка ДНК или РНК возбудителя) в исследуемом образце. • Высокая специфичность позволяет определять уникальный участок ДНК или РНК, характерный для конкретного возбудителя, что исключает возможность ложных реакций. • Высокая чувствительность метода ПЦР позволяет обнаружить даже единичные клетки возбудителей (вирусов, бактерий).

Чувствительность ПЦР-анализа составляет 10-1000 клеток в исследуемом образце (к примеру, чувствительность иммунологических и микроскопических тестов — всего 103-105 клеток).• Разработка универсальной методики ПЦР для обнаружения различных возбудителей. Объектом для исследования методом ПЦР служит генетический материал (ДНК, РНК) возбудителя.

Методика позволяет выявлять несколько возбудителей из одной биологической пробы. • Достаточно быстрое получение результата анализа. Полное исследование проводится за 4-4,5 часа, реже – несколько дольше.• Возможность обнаружения патогенов до возникновения симптомов заболевания (доклиническая диагностика) и после прошедшей болезни (ретроспективная диагностика).

Примером доклинической диагностики будет обследование в инкубационный период (с момента заражения до возникновения жалоб больного), а также латентная инфекция (когда симптомов нет совсем, а есть только лабораторные данные – ПЦР, к примеру). Одним из важных моментов ПЦР-диагностики является проведение ПЦР в архивном материале или биологических остатках, что важно для идентификации личности или отцовства.

В настоящее время ПЦР-диагностика подвергается существенному развитию. Происходит совершенствование самого метода, вновь и вновь появляются новые разновидности ПЦР, на медицинский рынок поступают новые тест-системы для данной реакции. Благодаря этому стоимость ПЦР-исследований с каждым годом становится доступнее для широкого круга пациентов.

Основными преимуществами анализа на инфекции ПЦР-методом являются:

• наиболее высокая чувствительность и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов;
• возможность выявления микроорганизмов в разнообразных биологических материалах (кровь, моча, влагалищный секрет, слюна и т.д.);
• возможность выявить одновременно несколько причинных микроорганизмов, если таковое наблюдается. Для сравнения — использование бактериологических методов не дает такой возможности, т.к. необходимо применение различных сред для выращивания различных болезнетворных микробов;
• возможность транспортировки биологического материала, т.к. для выявления возбудителя не обязательно сохранять его в живом виде;
• скоростьвыполнения анализа;
• точность проводимой этиологической диагностики;
• возможность количественного определения возбудителей — особенно актуально для условно-патогенных микробов, которые только по достижении определенной концентрации способны вызывать заболевание;
• способность контролировать течение инфекционного процесса при проведении лечения.

Мазок: норма и отклонения, или Кто попадает в группу риска

Для чего проводится: исследование позволяет оценить микрофлору — наличие болезнетворных бактерий и их количество.

Такой анализ, взятый у здоровой женщины, должен показать 95% лактобактерий в собранном материале. Лактобактерии вырабатывают молочную кислоту, тем самым защищая половые органы от проникновения инфекций и поддерживая нужную кислотность. У женщин «в положении» количество лактобактерий уменьшается, поэтому естественная защита организма ослабляется. Чтобы не допустить развития заболеваний, которые вызывают половые инфекции, мазок при беременности нужно сдавать всем будущим мамам без исключения.

Для выявления инфекций, которые нельзя обнаружить при помощи анализа на флору, берут мазок на скрытые инфекции. Один из самых распространенных методов выявления скрытых инфекций — метод ПЦР.

В норме микрофлора у здоровой женщины может содержать гарднереллы и кандиду, но их количество должно быть низким. Активно развиваться гарднереллы и кандиды начинают при снижении иммунитета. Защитные силы организма могут ослабляться по разным причинам:

• беременность;
• усталость;
• эмоциональное переутомление;
• наличие заболевания, борьбой с которым «занята» иммунная система.

При его оценке выделяют четыре группы чистоты.

• Первая. Реакция кислая — рН 4,0–4,5. Большинство микроорганизмов — палочки Додерлейна (они же лактобактерии), в небольшом количестве — лейкоциты в мазке, клетки эпителия. Такие результаты указывают на здоровую половую систему.
• Вторая. Реакция кислая — рН 4,5–5,0. Кроме лактобактерий, присутствуют грамотрицательные бактерии — это чаще всего возбудители инфекций, которые после лабораторного окрашивания обесцвечиваются.
• Третья. Реакция щелочная или слабокислая — рН 5,0–7,0. Преимущественно бактериальная микрофлора, клетки эпителия также в большом количестве. Обнаружено несколько лактобактерий.
• Четвертая. Реакция щелочная — рН 7,0–7,5. Лактобактерии отсутствуют, флора представлена болезнетворными организмами. Насчитывается большое количество лейкоцитов в мазке. Такой анализ указывает на воспаление слизистой влагалища.

Если результат плохой (3-й или 4-й группы), врач может направить вас на повторный анализ или на посев, чтобы уточнить результаты.

Расшифровка

Результаты могут быть разными в различных лабораториях. В зависимости от того, в какой лаборатории вы сдали мазок, норма может колебаться. Так как в каждой отдельно взятой лаборатории методы исследований могут отличаться, то и результаты будут различными. Желательно сдавать все анализы в одной лаборатории, чтобы можно было наблюдать за изменениями с течением времени и эти изменения не были связаны со сменой лаборатории, в которой вы сдаете анализы. Расшифровка должна проводиться врачом.

Для обозначения количества бактерий при исследовании мазков из уретры, влагалища, а также при анализе цервикального мазка используют КОЕ/мл. Читаются эти единицы измерения как количество колониеобразующих единиц в одном миллилитре жидкости.

Независимо от возраста, существуют факторы, которые повышают риск появления рака шейки матки. Их совокупность и продолжительное «действие» на организм снижают защитные силы организма в борьбе с болезнью даже на ранних стадиях развития.

Цервикальный мазок на онкоцитологию особенно важно сдавать женщинам, которые:

• имеют несколько сексуальных партнеров;
• начали половую жизнь раньше 18 лет;
• в прошлом перенесли раковые заболевания половой системы;
• курят;
• являются носителями вирусных инфекций;
• имеют ослабленный иммунитет.

Увеличивают риск появления рака шейки матки такие вирусные инфекции, как вирус простого герпеса, ВИЧ и вирус папилломы человека.

Повышение содержания белых кровяных клеток (лейкоцитов) в мазке наблюдается при таких патологических состояниях:

• воспаление слизистой оболочки влагалища;
• дисбактериоз влагалищной микрофлоры;
• кишечный дисбиоз;
• заболевания, передающиеся половых путем;
• воспаление слизистой оболочки матки;
• опухолевые процессы в органах малого таза;
• воспаление маточных придатков;
• грибковое поражение влагалища;
• уретрит;
• воспаление шейки матки.

Бывают ситуации, когда повышенные лейкоциты не свидетельствуют о наличии патологического воспалительного процесса в репродуктивной системе. В частности, увеличение содержания белых кровяных клеток в мазке может быть следствием воспаления в мочеполовой системе мужчины. Например, после незащищенного полового акта с мужчиной, который страдает простатитом, лейкоциты в мазке будут в увеличенном количестве. Это обязательно должно учитываться врачом при проведении диагностических мероприятий.

Для выяснения причины бесплодия мужчинам также берут мазок из мочеиспускательного канала. Повышение количества белых кровяных клеток свидетельствует о наличии воспалительного процесса в мочеполовой системе у мужчин. Эти патологические состояния могут приводить к нарушению репродуктивной функции и бесплодию.

Поэтому повышенные лейкоциты у представителей сильного пола являются серьезным маркером инфекционного процесса, который необходимо вовремя диагностировать и лечить. Для этого врач назначает соответствующее лечение, которое в большинстве случаев дает положительный эффект. Патологические изменения в мазке в виде повышения лейкоцитов могут быть признаком таких заболеваний, как цистит, простатит, орхоэпидидимит и так далее.

Таким образом, взятие мазка необходимо проводить как у женщин, так и у мужчин. Данное исследование позволит выявить воспалительные заболевания на ранних стадиях, которые проявляются повышением количества лейкоцитов. Это позволит вовремя назначать правильное лечение и повышать его эффективность.

Всем женщинам, независимо от того, находятся ли они в «интересном положении» или нет, мазок на флору берут одинаково. Разница лишь в периодичности: беременным, соответственно, чаще.

Даже если будущая мама в последнее время ничем не болела, она могла заразиться инфекцией и долгое время быть ее носителем. А так как при беременности иммунная система ослабляется, то и бактерии в это время могут начать активно размножаться.

Анализ мазка до и после беременности может значительно отличаться. Даже если до беременности симптомов болезни не наблюдалось, то с началом беременности чаще всего проявляются заболевания, которые передаются половым путем:

• гонорея;
• сифилис;
• уреаплазмоз;
• генитальный герпес;
• микоплазмоз и другие.

Если беременная женщина является носителем одной из половых инфекций, то, скорее всего, обнаружатся лейкоциты в мазке, норма которых превышена. В случае, когда у беременной в мазке повышены лейкоциты, доктор должен назначить лечение. Чтобы установить точный диагноз, сдают также мазок крови. Этот анализ проводится по такому же принципу, что и гинекологический. Мазок крови позволяет выявить такие заболевания, как малярия, тиф и другие.

При обнаружении лейкоцитов в мазке будущей маме обязательно нужно выявить причину воспаления и пройти курс лечения.

Нередко у беременных женщин начинается молочница, поэтому исследование также может показать увеличенное количество грибка рода кандида.

Для нормальной работы половых органов и хорошего самочувствия в организме должен быть баланс хороших и плохих бактерий. Мазок на степень чистоты может содержать в небольшом количестве или не содержать такие микроорганизмы и клеточные структуры:

• Атипичные клетки. Могут свидетельствовать о предраковом состоянии. Имеют неправильное строение.
• Ключевые клетки. Ключевые клетки в мазке — это клетки эпителия, «склеившиеся» гарднереллами или другими возбудителями. Ключевые клетки в мазке в повышенном количестве могут наблюдаться при сниженном иммунитете. В случаях, когда исследуют мазок на флору, к данной категории относят клетки плоского эпителия, которые склеены с возбудителями инфекции.
• Гарднереллы. Это мелкие палочки в мазке. При исследовании мазков из влагалища гарднереллы могут присутствовать в небольшом количестве. Если мазок на чистоту выявляет повышенное количество этих бактерий, развивается бактериальный вагиноз. Увеличенное их количество также наблюдается при дисбактериозе влагалища.
• Кандида. Этот грибок, как и гарднерелла, в небольшом количестве присутствует на слизистой влагалища у здоровых женщин. Если же количество грибка кандида превышает по численности лактобактерии, развивается вагинальный кандидоз (народное название — молочница). Мазок гинекологический подтверждает заболевание в скрытой форме при наличии спор, а в активной форме — при наличии грибковых нитей. Как правило, количество кандид увеличивается при сниженном иммунитете, в том числе при беременности.

Во влагалище у здоровой женщины живут до 40 видов различных бактерий. Пока общее количество лактобацилл преобладает, все бактерии, в том числе кандида и гарднерелла, «мирно» сосуществуют.

• Кокки (гонококк, стафилококк и другие кокки в мазке)

Кокки в мазке выглядят как шарообразные бактерии. Мазок на чистоту может содержать несколько видов кокков, но только внеклеточно. В обратном случае кокки указывают на венерическое заболевание.

• Гонококк. Грамотрицательная бактерия, которая размножается при повышенной влажности воздуха. Кроме гонореи, кокки в мазке этого рода бактерий вызывают воспаления мочеиспускательного канала, шейки матки, маточных труб, прямой кишки.
• Стафилококк. Самая распространенная — золотистый стафилококк — грамположительная бактерия. 20% населения планеты — носители этого вида кокков. Бактерии, относящиеся к этому роду кокков в мазке, вызывают легкие кожные инфекции (угри и пр.) и смертельно опасные заболевания (пневмонию, остеомиелит, эндокардит и другие).
• Стрептококк. Грамположительная бактерия, которая живет в небольшом количестве в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) и дыхательных путях, а также в полости носа и рта. Если у беременной в повышенном количестве обнаружены стрептококки в мазке, они могут быть причиной выкидыша, ранних родов и мертворождения. Кроме этого, вызывают такие заболевания, как скарлатина, бронхит, ангина, фарингит и прочие. В единичных количествах стрептококки в мазке могут входить в число нормы.
• Энтерококк. Грамположительная бактерия, которая входит в состав микрофлоры ЖКТ. Выдерживает нагревание до 60 °С в течение получаса. Такие кокки в больших количествах указывают на воспаления мочеполовой системы, органов малого таза и другие заболевания.

• Трихомонада. Мазок на инфекции не всегда выявляет трихомонаду, так как эта бактерия может иметь измененные формы. Чтобы подтвердить ее наличие, делают бактериологический посев.

На чем основан метод ПЦР

ПЦР анализ — что это такое? Это метод использует принципы молекулярной биологии. Для исследования материала применяются особые ферменты, которые многократно и быстро копируют ДНК, РНК фрагменты возбудителей болезни. Существует разные виды ПЦР анализа в зависимости от исследуемого материала (кровь, моча, кал и т.д.). После обработки сотрудники лаборатории сравнивают с базой данных полученный результат, выявляют концентрацию, тип возбудителя.

Анализ на ПЦР помещают в специальный амплификатор (прибор), который нагревает и охлаждает пробирки с биоматериалом. Изменения температуры нужны для репликации фрагментов. Точность результата будет зависеть от точности температурного режима. Метод полимеразной цепной реакции помогает выявить:

• инфекционный мононуклеоз;
• ВИЧ;
• цитомегаловирусную инфекцию;
• вирусные гепатиты G, C, B, A;
• инфекции/заболевания, передающиеся половым путем (ИППП/ЗППП): гарднереллез, трихомониаз, уреаплазмоз;
• герпетическую инфекцию;
• онкогенные вирусы;
• листериоз;
• хеликобактерную инфекцию;
• клещевой энцефалит, боррелиоз;
• туберкулез;
• кандидоз.

На данный момент из-за новизны технологии анализ крови методом ПЦР все еще имеет высокую цену. Для подготовки биоматериала не нужно соблюдать определенные требования. Даже вызванные физическими нагрузками, стрессами, сменой рациона питания изменения состава не влияют на результат исследования. ПЦР анализ крови может испортить только прием антибактериальных средств, поэтому перед сдачей необходимо выдержать паузу между лечением и тестом.

ПЦР исследование крови – самый распространенный вариант диагностики хронических, острых инфекционных патологий при вирусном или атипичном проявлении. Серологические методы исследования имеют определенную трудность при проведении – определение наличия возбудителя проводится по наличию антител в организме человека. Результат мог быть ложноотрицательным, если состояние больного не давало время для их выработки.

В сфере гинекологии для исследования наличия инфекционных микроорганизмов используют ПЦР анализ мазка. Работа с материалом проводится по тому же принципу, что и с кровью: многократное увеличение фрагментов ДНК возбудителя, чтобы с легкостью его идентифицировать. Это же помогает обнаружить скрытые инфекции у женщины.

Для проведения ПЦР существуют определенные показания. Нередко его нужно сделать, чтобы выявить устойчивый к антибиотикам вид возбудителя. У женщин основными показаниями для диагностики по этому методу выступают:

• беременность, которая протекает тяжело;
• острая фаза ИППП;
• если есть подозрение на переход ИППП в хроническую стадию;
• поиск причин бесплодия.

Для выявления инфекции может быть назначен со стороны врача анализ кала на ПЦР. Для того, чтобы получить максимально достоверные результаты после теста, необходимо придерживаться следующих правил перед забором биоматериала:

• за несколько суток прекратить прием слабительных препаратов: масла, свечи;
• исключить медикаменты, которые дают специфическую окраску калу, к примеру, с содержанием железа.

Для забора следует использовать стерильную палочку и контейнер. Чем-либо их дополнительно протирать, ополаскивать не нужно. При сборе материала будьте осторожны, вы не должны задеть рукой внутренние стенки контейнера. Следите, чтобы в кале не было примесей мочи, нельзя использовать дополнительные вспомогательные средства для испражнения (клизма). Собирать материал нужно в день сдачи, хватит 1/3 объема контейнера. Данный метод диагностики имеет следующие преимущества:

1. Анализ способен указывать на ДНК паразита, другие же тесты могут определять только остатки их жизнедеятельности.
2. Высокая точность, будет установлен возбудитель.
3. Ультрачувствительный анализ, который способен выявить даже одну клетку вируса.
4. Результат исследования ПЦР будет готов через 4-5 часов.

При необходимости для проведения теста врач может взять для исследования мочу. Высокая точность открывает возможность работать с любой биологической жидкостью, из которой удается извлечь ДНК вируса. Чтобы сдать анализ мочи ПЦР, нужно придерживаться таких ограничений перед забором материала:

• минимум за 1 день до процедуры прекратить половые контакты;
• за 3 недели до сдачи должно быть окончено любое антибактериальное лечение, потому что медикаменты смажут картину;
• сдавать анализ нужно натощак (жидкость тоже запрещена);
• брать нужно первую утреннюю порцию материала.

Основой полимеразно-цепной реакции является многократное удвоение (амплификация) определённого участка ДНК или РНК при помощи ферментов в лабораторных условиях. В результате образуется то количество ДНК или РНК, достаточное для визуального анализа. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе.

Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя (слюна, кровь, моча, выделения из половых органов), помещается в специальный реактор (амплификатор). Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии.

Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека.

Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее.

Современные способы диагностирования без труда выявляют большой спектр возбудителей инфекций. Самым лучшим из всех способов исследования считается метод полимеразной цепной реакции. ПЦР диагностика определяется как экспериментальный метод молекулярной биологии. С помощью него можно сверхточно определить присутствие возбудителей болезни при единичном количестве молекул ДНК и РНК.

Полимеразная цепная реакция заключается во множественном синтезе копий генетического материала патогенов в лабораторных условиях. Чтобы лучше понимать суть метода, стоит вспомнить, что хранилищем информации служит дезоксирибонуклеиновая кислота.

ДНК образуют 2 нити, сформированные нуклеотидами. Нуклеотидов существует четыре. Они обладают свойством комплементарности. В поочередном порядке нуклеотидов зашифрованы данные, являющиеся уникальными для любого живого организма.

Существует несколько вирусов, у которых информация о наследственности зашифрована в РНК. РНК, так же как и ДНК обладает уникальностью. Следовательно, проведя идентификацию ДНК, можно определить, к какому микроорганизму она относиться. Этот процесс чем-то напоминает идентификацию отпечатков пальцев человека, которые являются уникальными у каждого.

Получив ДНК патогена от пациента, происходит быстрая идентификация. Исходя из этого, ПЦР диагностика заключается в вычислении возбудителя болезни их ДНК или РНК. Этот метод определяет ДНК и РНК не только живых, но и нежизнеспособных микроорганизмов.

Метод ПЦР определяет наличие инфекций, имеющих явно выраженные симптомы, и тех, которые не дают никакой клинической картины.

Список бактерий и вирусов, выявляемых с помощью ПЦР огромен. Кроме представленных выше есть еще и множество других.

2. Мазок на стерильность

Для чего проводится: позволяет определить наличие или отсутствие половых инфекций, оценить гормональный фон женщины, а также состав содержимого влагалища, во время беременности результаты мазка позволяют оценить угрозу выкидыша.

Этот анализ называется мазок на степень чистоты, или мазок из влагалища «на стерильность».

Плоский эпителий — клетки слизистой оболочки шейки матки и влагалища. Анализ женщины, которая здорова, обязательно его показывает в небольшом количестве. Если же эпителий в мазке отсутствует, это указывает на гормональные нарушения, при этом уровень андрогенов повышен, а эстрогенов — понижен. Эпителий в повышенном количестве свидетельствует о воспалении.

Цервикальный мазок с повышенным уровнем плоского эпителия указывает на воспаление в шейке матки, мазок из уретры — в мочевом пузыре, мазок из влагалища, соответственно, — на воспаление стенок влагалища.

На количество плоского эпителия также влияет фаза цикла. В зависимости от того, на какой день был сделан анализ на флору, норма бывает разной.

Если вы сдали мазок на флору, расшифровка его должна проводиться лечащим врачом.

• Лактобактерии (синонимы: грамположительные палочки, лактобациллы или палочки Додерлейна)

При здоровых половых органах лактобактерии (палочки) в мазке преобладают. Результаты мазков, в которых количество лактобацилл составляет 95% от общего числа бактерий, считаются хорошими. Иногда при исследовании количество лактобацилл бывает ниже нормы. При этом кислотность во влагалище снижается и болезнетворным микробам легче проникнуть в организм.

При исследовании мазков определяют количество лейкоцитов — это один из важных показателей.

Лейкоциты — «защитники» организма. Лейкоциты в мазке присутствуют в большом количестве, когда в организме активно размножаются болезнетворные бактерии. То есть чем сильнее в анализе повышены лейкоциты, тем более выражен воспалительный процесс.

Если цервикальный мазок содержит до 30 лейкоцитов, из уретры — до 5, а из влагалища — до 10, это нормально. Такие значения характерны для всех женщин, которые живут половой жизнью.

Лейкоциты в мазке, норма которых значительно повышена, указывают только на наличие воспалительного процесса. Причину инфекции должен установить врач. Для этого необходимо провести дополнительные исследования, например бактериальный посев, иммунологический анализ и полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Количество эритроцитов повышается в период менструации, травм слизистой оболочки влагалища или при воспалении. Анализ в норме может содержать несколько эритроцитов.

Слизь выделяют железы шейки матки и влагалища — мазок из влагалища и из шейки матки должен содержать ее в небольшом количестве.

Какие инфекции можно выявить с помощью ПЦР-диагностики

Учитывая спектр возбудителей, ПЦР-диагностика активно используется в гинекологической, урологической практике, практике инфекциониста, в пульмонологии, фтизиатрии, гастроэнтерологии, гематологии, онкологии и других.

3. Мазок на скрытые инфекции и полимеразная цепная реакция

Для чего проводится: позволяет обнаружить инфекции, которые невозможно выявить при анализе мазка на флору

В 1983 году американский биохимик Кэри Муллис разработал метод полимеразной цепной реакции, за что удостоился Нобелевской премии. Благодаря ученому появилась возможность «узнавать в лицо» бактерии и вирусы даже при их минимальном количестве. Часто полимеразную цепную реакцию называют ПЦР-диагностикой.

Полимеразная цепная реакция — это метод биологических исследований, при котором в лаборатории размножают участок ДНК.

Для чего нужен ПЦР-анализ? При исследовании нужно выделить, какой вид инфекции вызывает заболевание. Но бактерий иногда бывает настолько мало, что распознать их невозможно. В таких случаях спасает ПЦР-диагностика инфекций.

Для анализа берут участок ДНК бактерии и многократно его клонируют. Когда ДНК «вырастает», можно определить, с каким видом бактерий или грибков лаборант имеет дело.

ПЦР-диагностика инфекций дает точный результат. Она позволяет выявить не только род, но и вид бактерий: например, не только сказать, что грибок рода Candida, но и уточнить, что он относится к Candida albicans. Если не установить точный вид инфекции, лечение может быть неэффективным.

Часто ПЦР-диагностикой пользуются при исследовании мазков на инфекции, передающиеся половым путем. Большинство венерических заболеваний, такие как гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, гонорея, уреаплазмоз, на ранних стадиях развития могут не проявлять признаков. Симптомы появляются на поздних стадиях. Благодаря ПЦР-анализу половые инфекции можно выявить на начальном этапе развития и, соответственно, быстро их излечить.

При проведении такого анализа можно выявить также такие вирусные инфекции, как гепатит или папиллома. Другими методами можно выявить не сам вирус, а только наличие продуктов его жизнедеятельности либо антител к нему.

Метод полимеразной цепной реакции позволяет определить инфекции в любой среде: в крови, моче, слюне, на слизистых оболочках. Кроме этого, благодаря ПЦР-анализу выделяют вирусы в почве и воде.

Достоинства полимеразной цепной реакции:

• точность определения инфекции;
• возможность выделить вирус (а не продукты распада или антитела на него);
• достаточно небольшого количества исследуемого материала (даже при наличии одной клетки возбудителя);
• возможность обнаружить инфекцию в любой среде (моче, крови, слюне);
• скорость проведения анализа;
• единственный метод для выделения некоторых инфекций.

Сдача анализов ПЦР

Если вам интересно, как берут анализ ПЦР, то следует рассматривать каждый отдельный случай, учитывая тип биоматериала. Соскоб, мазок или забор крови имеет свои особенности, к примеру:

• плазма сдается утром;
• моча берется только первая утром, в лабораторных условиях в стерильный контейнер;
• мазок или соскоб будет показателен только после воздержания от половых контактов не менее 3 суток;
• нельзя сдавать мазок во время менструации и через 2 суток после нее.

Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток, тканях плаценты, крови, соке простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость.

При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры (мочеиспускательного канала), моча.

При обследовании на инфекции (герпетические инфекции, ЦМВИ, мононуклеоз, токсоплазмоз, гепатиты В, С, ВИЧ-инфекция) на ПЦР забирают кровь.

Для диагностики инфекционного мононуклеоза, ЦМВИ, герпетической инфекции забирается мазок из зева, для обследования на ЦМВИ – моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость.

В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость.

При обследовании на внутриутробные инфекции – околоплодные воды, ткани плаценты.

Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала.

 1) не жить половой жизнью за сутки до сдачи материала;2) кровь для исследования сдается утром натощак (не есть, не пить);3) при сдаче мочи собирается первая утренняя порция в чистый стерильный контейнер.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) считается одним из надежных способов определения наличия бактерий и вирусов в организме человека. Исследование проводят с помощью биоматериалов — слюны, выделений, крови, мокроты и иных субстанций организма. Взятые на анализ материалы смешивают с реактором, который выявляет наличие чужеродных ДНК в составе выделений человека.

Специальные ферменты провоцируют цепную реакцию роста молекул ДНК микроорганизмов, с помощью которой появляется возможность их обнаружения. Помимо выявления присутствия возбудителя в тканях организма, мазок позволяет установить вид и количество находящихся бактерий.

Преимущество данного метода исследования заключается в возможности обнаружить вирус даже по частичным фрагментам его ДНК в выделениях человека — цепная реакция выстраивает молекулы ДНК полностью. Другими преимуществами ПЦР метода являются:

• быстрый результат, в сравнении с бактериальным посевом и иными методами, — ответ готов в тот же день после сдачи анализов;
• возможность исследования любого биоматериала — крови, слюны, выделений из матки и т.д;
• возможность определения вида вируса, точность диагностики.

Помимо преимуществ, метод имеет и свои недочеты. К ним относится:

• вероятность неточного результата после курса антибиотиков — анализ обнаружит мертвые структуры бактерий и покажет их наличие в организме;
• невозможность выявления гарднереллеза — небольшое количество бактерий постоянно присутствует во влагалище;
• метод не в состоянии определить мутацию вирусов, способность видоизменяться.

Чтобы исследование биоматериала было максимально точным, выполняйте данные правила:

• кровь сдают с утра натощак, за сутки до забора плазмы нельзя кушать сладкое, соленое и пить спиртное;
• урину сдают рано утром, первую порцию;
• мазок эпителия слизистых половых органов берут после воздержания от интимных контактов в течение трое суток;
• мазки не сдают во время критических дней, только на третьи сутки после менструации.

Обычно для исследования микроорганизмов берут биоматериал соответствующих болезни слизистых оболочек и выделений:

• при заболевании мочеполовой системы — забор урины;
• при заболевании легких/бронхов — мокроту;
• ИППП заболевания — исследуют эпителий соответствующих слизистых оболочек;
• при подозрении на гепатит — исследуют кровь пациента;
• при диагностике хеликобактерной инфекции — используют биоптаты.

Исследование туберкулеза внутренних органов проводят с помощью полимеразной цепной реакции. Палочки Коха могут поражать не только ткань легких, но и кишечник, кожу, почки и другие внутренние органы.

Целенаправленно готовиться к сдаче анализа, который будет проводиться методом ПЦР, не требуется. Однако очень важно, чтобы специалист производил забор материала с соблюдением всех необходимых условий стерильности.

Так, например, для взятия крови следует применять специальные вакуумные системы, для взятия секрета половых органов следует использовать специальные пробирки и т.д.

В некоторых случаях в лабораторию материал следует транспортировать. Чтобы это сделать правильно, необходимо герметично закрыть емкость с биологическим материалом. Это позволит предупредить проникновение туда иных микроорганизмов, обитающих во внешней среде.

4. ПАП-тест, или цитологический мазок

Для чего проводится: позволяет диагностировать рак шейки матки.

ПАП-тест имеет разные названия: мазок на цитологию, а также тест, анализ или мазок по Папаниколау, мазок на атипичные клетки. Анализ назван в честь греческого ученого, который впервые применил этот метод. Чтобы провести ПАП-тест, берут мазок из цервикального канала (шейки матки) во время гинекологического осмотра на кресле.

Цитологический мазок у женщины старше 30 лет — это обязательный ежегодный анализ. Результаты мазка цервикального канала помогают диагностировать рак шейки матки — второе по распространенности онкологическое заболевание среди женщин.

На результаты исследования могут повлиять некоторые факторы. Чтобы получить достоверный результат, за 2–3 часа до взятия мазка воздержитесь от посещения туалета. Иначе вы смоете эпителий и бактерии, которые важны для исследования мазка из влагалища.

Чтобы результаты были точны, за 48 часов до исследования:

• не занимайтесь сексом;
• не проводите спринцеваний (чтобы не вымыть содержимое влагалища);
• не пользуйтесь вагинальными контрацептивами (спермицидными кремами, мазями, пенами);
• не принимайте ванны;
• не пользуйтесь тампонами или вагинальными свечами.

Взятие мазка из шейки матки

Расшифровка мазка и, соответственно, успешность лечения зависят от того, следовала ли женщина перечисленным выше требованиям. Мазок по Папаниколау можно сдавать в любой день цикла, когда нет менструальных выделений.

Взятие мазка производит гинеколог при осмотре на кресле.

Шпатель Эйра — пластиковая палочка для взятия цервикального мазка

При этом врач пользуется гинекологическим зеркалом и шпателем Эйра — специальной пластиковой палочкой. По времени взятие мазков занимает не более двух минут. Процедура безболезненна.

Забор мазков производят в трех местах — возможных очагах инфекций: берут мазок из цервикального канала (шейки матки), из влагалища и отверстия уретры.

Взятие мазков из цервикального канала

Исследование проводится путем изучения под микроскопом или бактериологического посева. В большинстве случаев у женщин после мазка не возникает ощущения дискомфорта. Лишь изредка могут наблюдаться мажущие выделения из влагалища и болезненные ощущения внизу живота. Через несколько часов они должны пройти.

Воздерживаться от секса после мазка не нужно. Начиная с 18 лет, даже если девушка не живет половой жизнью, специалисты рекомендуют проходить ежегодные профилактические осмотры и сдавать мазок на онкоцитологию. А тем, кто ведет половую жизнь, независимо от возраста советуют посещение гинеколога с началом интимных отношений. Чтобы обнаружить рак шейки матки на ранних стадиях развития, после 30 лет проходите обследование у гинеколога не реже двух раз в год.

Дисплазия шейки матки

При наличии «неправильных» клеток в результате анализа цервикального мазка на цитологию врач использует специальный термин: дисплазия.

Дисплазия — это состояние шейки матки, при котором у части клеток нарушена структура. Это означает, что клетки могут перерасти в раковые. Поэтому такая патология может быть предраковым состоянием.

Риск развития патологии повышается при:

• курении;
• большом количестве родов;
• долгом применении внутриматочных и гормональных контрацептивов;
• недостатке витаминов;
• наличии инфекций, передающихся половым путем (особенно вируса папилломы);
• ранней половой жизни (до 16 лет);
• родах (до 16 лет);
• большом количестве сексуальных партнеров (три и более);
• генетической предрасположенности.

Дисплазию шейки вызывает вирус папилломы человека (ВПЧ) типов: 6, 11, 16, 18, 31, 33 и 35.

Признакамимогут быть:

• частые воспалительные процессы;
• мажущие кровянистые выделения;
• кровотечения после полового акта или при использовании тампонов.

У некоторых женщин при дисплазии наблюдаются боли внизу живота.

ПЦР диагностика в гинекологии: что это такое, суть метода и подготовка

Исследование мазка из влагалища, уретры и шейки матки нужно проводить женщинам, которые:

• начали жить половой жизнью;
• забеременели;
• планируют беременность;
• имеют несколько половых партнеров;
• чувствуют дискомфорт в половых органах (боль во время секса, частое мочеиспускание или жжение в половых органах и другие);
• старше 18 лет;
• проходят профилактический осмотр.

Регулярные осмотры в кабинете гинеколога, во время которых можно сдать анализ мазка, позволяют вовремя заметить начало болезни, поставить правильный диагноз и даже спасти жизнь. Например, дисплазия матки, лечение которой начали вовремя, не переродится в неизлечимую злокачественную опухоль.

Расшифровка результатов ПЦР

Из вышенаписанного понятно, что такое ПЦР анализ и видны явные преимущества такого метода исследования. Еще один плюс данной диагностической процедуры – простота расшифровки результатов. Учитывая, сколько делается анализ ПЦР (сам процесс занимает около 5 часов, но лаборатория выдает данные через 1-2 суток), данный метод диагностики становится лучшим вариантом для определения множества инфекций. По результатам врач может сказать вам, что тест:

1. Отрицательный – в исследуемом материале не было искомого возбудителя.
2. Положительный – были найдены РНК, ДНК возбудителя.

Иногда проводится количественное определение микроорганизмов. Это необходимо при заболеваниях, которые вызывают условно-патогенные возбудители. Особенность этих вирусов в том, что проявляются они только при избыточном количестве и найти их обычными исследованиями крайне проблематично. Этот фактор важен для выбора терапевтической тактики, чтобы эффективно лечить вирусные инфекции, к примеру, гепатит, ВИЧ.

На 12 инфекций

Чтобы понять до конца, что такое ПЦР диагностика инфекций и насколько она эффективна, нужно узнать, что она способна выделять до 12 возбудителей. Проводится текст только в лабораторных условиях. Для исследования применяют специальные ферменты, которые увеличивают во много раз количество РНК, ДНК фрагментов вируса. Анализ ПЦР на 12 инфекций способен выявить:

• микобактерии туберкулеза;
• ВИЧ;
• цитомегаловирус;
• гепатит C, G, B, A;
• герпес 1, 2 типа;
• вирус Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз);
• инфекции, которые передаются половы путем, к примеру, хламидии;
• листериоз;
• ВПЧ;
• кандидозную инфекцию;
• хеликобактер пилори;
• боррелиоз, клещевой энцефалит.

На гепатит С

Этот диагностический метод помогает определить наличие вируса в крови. Это дает врачам возможность говорить о его наличии или отсутствии. Анализ ПЦР на гепатит С бывает двух видов: качественный и количественный. Первый вариант указывает только на его наличие и может иметь формулировку «обнаружен»/«не обнаружен».

Количественный анализ более точный и покажет концентрацию инфекции в крови. Обозначается этот показатель как «вирусная нагрузка», измеряется в количестве вирусной РНК на конкретный объем крови. Расшифровка в разных лабораториях может отличаться. Помимо измерения в МЕ/мл используются единицы измерения «копии».

На туберкулез

Делать тест следует в утреннее время. Это важно для того, чтобы не дать всему массиву мокроты, который образовался за ночь, выйти из желудка. Анализ ПЦР на туберкулез так же важен как ИФА, Манту, томографе. Тест помогает выделить наличие микобактерий, состояние мочи, общий иммуноглобулин, СОЭ, определить состояние легких на данный момент. Для точности получения результатов при анализе ПЦР необходимо проводить его с соблюдением следующих правил:

1. Осуществляется посев 3 раза, но полную аспирацию содержимого желудка следует проводить только в условиях стационара.
2. Выявляет микобактерии посев наличествующих масс в желудке менее чем в 50% диагнозов. Даже при получении оптимальных условий рекомендуется вместо них УЗИ.
3. Даже при отрицательном характере результата не может быть полностью исключена вероятность развития туберкулеза с изменением СОЭ, иммуноглобулина или других показателей.
4. Посев материалов при ПЦР менее восприимчив на патологические состояния, если получен он в рамках бронхоскопического обследования, который исключает подозрения на ТБ у ребенка.

На ВИЧ

Для многих людей данный диагноз считается смертельным приговором. По этой причине после частых половых связей человек становится более внимателен к сигналам, которые подает его тело (а иногда придумывает их). Самый надежный вариант получить подтверждение или опровержение данного заболевания – ПЦР анализ на ВИЧ. Тест можно использовать для определения следующих возможных проблем со здоровьем:

1. Опровержение/подтверждение наличия ВИЧ в период серонегативного кона.
2. Определение генотипа ВИЧ-1, ВИЧ-2.
3. Уточнение описания патологического процесса при сомнительном результате иммуноблота.
4. Заражение после переливания крови.
5. Определения ВИЧ-статуса у детей, которые родились от матерей-носителей заболевания.
6. Помогает установить наблюдение за вирусной загруженностью организма.

На ВПЧ

Вирус папилломы может быть выявлен у любого человека, долгое время он может находиться в латентном состоянии. Развитие провоцирует ослабление иммунитет, стрессы или эмоциональные всплески. Анализ ПЦР на ВПЧ помогает определить концентрацию вируса в крови. По этой причине рекомендуется проводить количественно определение, а не качественное. Эти данные помогут спрогнозировать вероятность развития злокачественного характера инфекции.

Методика диагностики наличия ВПЧ основывается на основном свойстве ПЦР выделять из материала ДНК вируса. Из-за высокой чувствительности теста даже небольшое количество бактерий будет обнаружено. Количественное исследование открывает врачам возможность установить степень опасности заболевания, составить прогноз на будущее.

На герпес

Данный вид диагностики в микробиологии помогает с высокой точностью проводить анализ ПЦР на герпес. Копирование фрагментов ДНК вируса будет происходить только, если в материале присутствует нужный ген. В данном случае тест по результатам проведения может указать на наличие или отсутствие возбудителя. Выявить его удастся даже при низкой концентрации в крови.

Еще один плюс анализа ПЦР в том, что он может определить герпетическую вирусную инфекцию сразу же после заражения, до появления клинической симптоматики. Можно определить тип герпеса (1 или 2), для сдачи анализа специфической подготовки не требуется, но врачи рекомендуют перед забором крови отказаться от:

• жареного;
• острого;
• алкоголя;
• жирного.

При беременности

При вынашивании ребенка очень важно провести данное исследования, чтобы поставить на учет состояние женщины. ПЦР анализ при беременности входит в перечень самых эффективных методов определения наличия разнообразных заболеваний. Провести тест нужно не только для выявления патологий, но и для определения вероятности заражения ребенка внутриутробно. Только благодаря ПЦР-диагностики стало возможным выявить степень прогрессирования, развитие множества инфекций внутри утробы матери.

Отрицательный результат ПЦР указывает на то, что в исследуемом материале на момент его сдачи не обнаружено никаких следов инфекционных агентов. Большинство случаев показывает отсутствие инфекции, которую пытались найти в исследуемой пробе.

Положительный результат ПЦР указывает на выявление следов инфекции в исследуемой биологической пробе. С большой точностью положительный результат указывает на наличие инфекции в данный момент времени.

Существуют ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, а об активной инфекции говорить нельзя – это так называемое «здоровое носительство» без клинических симптомов болезни, которое не требует лечения, но требует динамического наблюдения у врача.  Наблюдается чаще при ряде вирусных инфекций (ВПЧ, ЦМВИ, ВЭБ-инфекция, герпетическая инфекция и другие) в таких материалах как слюна, соскоб цервикального канала, уретры, то есть из местного очага.

Количественный результат ПЦР оценивается только врачом индивидуально для той или иной инфекции отдельно и не имеет общих градаций. На основании количественного результата ПЦР врач может установить степень активности инфекции и выставить стадию болезни, что безусловно отразится на курсе и дозах назначенных лекарственных средств.

Результаты ПЦР-анализа могут быть двух вариантов:

• положительный – возбудитель обнаружен;
• отрицательный – возбудитель не выявлен.

В данном случае ориентироваться необходимо на данные полимеразной реакции, т.к. она позволяет выявить заболевание на доклинической стадии.

Иногда может быть получен сомнительный ответ, когда количество выявленных копий соответствует верхней границе нормы. Чтобы уточнить причину заболевания, следует повторить анализ, уделив особое внимание условиям сбора биологического материала.

Оглавление

• Показания
• Подготовка к процедуре
• Результаты исследования

ПЦР-анализ — что это такое, расшифровка исследования и все связанные с процедурой нюансы будут описаны лечащим врачом. Цепная полимеразная реакция позволяет идентифицировать возбудителя инфекционных заболеваний у мужчин и женщин. Расшифровка результата проводится с учетом генетического материала образца.

Показания

Рассматриваемый метод диагностики применяется в криминалистике, генотипировании, педиатрии, гинекологии. ПЦР-анализ показан в следующих случаях:

• при подозрении на инфекционное заболевание;
• женщинам в положении (в первом триместре);
• острое и хроническое течение ИППП;
• бесплодие;
• для выявления устойчивости определенного вида микроба к антибиотику;
• определение биологической чистоты донорской крови.

Женщинам перед сдачей мазка необходимо выполнить следующие рекомендации:

• за месяц до исследования прекращается прием препаратов;
• материал сдается до месячных либо через 4 дня после окончания менструации;
• за 2-3 суток до исследования пациентка должна отказаться от полового контакта;
• за 3 часа до исследования нельзя мочиться (если материал берется из уретры);
• использовать антибактериальные средства личной гигиены.

Чтобы взять из канала шейки матки мазок на ПЦР, гинеколог использует специальную щеточку. Ферменты и собранный материал помещают в реактор. Затем копируется ДНК. Данный процесс протекает в несколько этапов. Полученные копии ДНК микробы сравнивают с базой данных, в которой содержится информация о генетическом строении различных микроорганизмов.

Насколько точна ПЦР-диагностика?

1. Точность (с высокой долей вероятности возможно выявление или отсутствие инфекции).2. Специфичность (точность выявления конкретной инфекции).3. Чувствительность (даже при низком содержании генетического материала возбудителей в исследуемом образце инфекция будет обнаружена).

Полимеразно-цепная реакция практически не выдает ложноположительных результатов (то есть не бывает положительных проб там, где инфекция отсутствует). Ложноотрицательные результаты наблюдаются редко (чаще это связано с отсутствием активной инфекции у человека в данный момент). Например, латентная инфекция, хроническая инфекция вне активности.

Врач инфекционист Быкова Н.И.

Основные преимущества ПЦР-диагностики можно сформулировать в виде нескольких тезисов:

• возможность получения огромного числа копий патогенных микроорганизмов;
• большое количество копий – это залог успешного секвенирования (выявления).

Поэтому метод особенно информативен для выявления туберкулезных микобактерий и других подобных инфекционных агентов. Он обладает высочайшей точностью и не нуждается в перепроверке полученных результатов (кроме казуистических случаев).

Для получения наиболее достоверных результатов необходимо выполнение двух основных условий, которые предупреждают экзогенное (внешнее) инфицирование:

• правильный забор материала;
• правильная транспортировка.

Как сдавать мазок на ПЦР и что это такое?

Данный вид исследования относится к современным и высокотехнологическим способам диагностики. Сдавать анализы методом ПЦР следует в лабораториях, которые обладают всем необходимым комплексом для получения полноценных результатов. Не меньшую роль играют квалифицированные, подготовленные кадры. Отдайте предпочтение крупными, серьезным, известным лабораториям. Это поможет не только получить результаты быстро, но и обеспечит их достоверность.

Мазок на ПЦР — что это и когда его нужно сдавать? С помощью этой диагностики можно определить тип возбудителя инфекционного заболевания за счет выявления его генетического материала.

Полимеразная цепная реакция заключается в помещении материала в реактор. Затем к материалу добавляются ферменты, которые связываются с ДНК микроорганизма. Наблюдается синтез ее копии. Последний процесс состоит из нескольких этапов:

• образование 2-х новых частиц;
• образование 4-х новых частиц;
• создание нескольких сотен копий;
• анализ и сравнение копий с базой данных.

Расшифровка анализа позволяет определить тип инфекции, при этом дается количественная оценка микробов. Исследование обладает следующими преимуществами:

• выявление белков-маркеров;
• определение высокой специфичности и чувствительности;
• выявление возбудителей.

Чтобы получить результат ПЦР на хламидии и прочую инфекцию, потребуется 4-5 ч. Подобная методика выявляет острых и латентных микробов. ПЦР-диагностика предусматривает применение следующего материала:

• моча — при инфицировании мочеполовой женской и мужской системы;
• эпителиальные соскобы со слизистой оболочки — диагностирует заболевания, передающиеся половым путем;
• мокрота — диагностирует туберкулез, микоплазмоз и хламидиоз респираторной формы; мокрота собирается в стерильный флакон;
• плазма, сыворотка, кровь — для выявления вирусов гепатитов B, C, D и G;
• биоптаты — для диагностики хеликобактерной инфекции;
• жидкости биологические.

В период беременности лабораторные исследования приобретают особое значение, так как существует риск инфицирования малыша. Прежде чем встать на учет, каждая будущая мама должна сдать анализы на ТОРЧ-инфекции. Для проведения исследования в качестве материала используют ворсинки хориона либо амниотическую жидкость.

Внутриутробные инфекции у младенцев диагностируются с помощью ПЦР-анализа.

Серодиагностика в этом случае малоэффективна, так как она выявляет антитела ДНК к инфекциям. Иммунная система у малыша формируется через 2-3 мес. после рождения. В этот период молекулы класса IgG проникают в организм ребенка через плаценту. К осложнениям хламидиоза в период беременности относят пневмонию, конъюнктивит и прочие недуги, которые проявляются у малыша.

Выявление инфекций

Перед планированием беременности гинекологи рекомендуют сдать анализ ПЦР. Исследование поможет выявить наличие скрытых инфекций в организме будущих родителей, тем самым предотвратить их проникновение в организм малыша.

Определение ВИЧ-инфекций — основное предназначение полимеразной цепной реакции. Вирус способен блокировать иммунитет организма, предоставляя возбудителям иных недугов свободный доступ к проникновению в организм. ВИЧ передается половым путем либо через кровь. Выявить это заболевание можно с помощью иммуноферментного анализа и ПЦР диагностики.

Рассматриваемая методика может выявить вирусный гепатит, для которого характерно поражение клеток печени. В этом случае анализ сдается дополнительно к другим методикам исследования. ПЦР диагностика предусматривает изучение генетического материала инфекций (из образца).

Туберкулез — это заболевание, вызываемое палочкой Коха. Инфекция передается воздушно-капельным путем, поражая легкие. Для диагностики этого недуга периодически делается проба Манту — введение возбудителя и отслеживание за иммунной реакцией организма. С помощью ПЦР диагностируется поражение палочкой Коха кожи, почек, кишечника и прочих органов.

Для различных заболеваний пищеварительной системы характерны схожие симптомы, вызванные разными возбудителями. Для их определения специалисты применяют одновременно несколько методик исследования. Для быстрого лечения острой кишечной инфекции потребуется определить тип инфекции. В этом случае применяют ПЦР-диагностику.

В исследуемом материале могут содержаться микроорганизмы либо их фрагменты. Для исследования берут выделения и мазок из шейки матки, чтобы выявить инфекции половых мужских и женских органов.

Диагностика ВИЧ-инфекции и вирусного гепатита С предусматривает сдачу крови. Чтобы диагностировать инфекционный мононуклеоз, используют мазок из зева. Предварительно рекомендуется выяснить, какой материал будет использоваться для анализа.

Если в исследуемом материале присутствует инфекция, тогда результат ПЦР будет носить отрицательный характер. Это означает, что в организме пациента отсутствует инфекция, которую пытались выявить с помощью данной методики. Положительный результат получают при развитии инфекционного процесса в организме пациента. С помощью рассматриваемого метода исследования можно:

• выявить наличие либо отсутствие микроорганизмов;
• определить тип инфекции;
• выявить инфекции при низком содержании ДНК микробов в исследуемом материале.

ПЦР, в отличие от иных методик диагностики инфекций, редко дает ложно-отрицательный результат и практически никогда не дает ложно-положительного. Лечение назначается после проведения полного обследования пациента.

101analiz.ru

zeleno-mama.ru

Гинекологический анализ пцр. Метод ПЦР в гинекологии. ПЦР-диагностика внутриутробных инфекций

Гинекологические заболевания часто являются последствием прогрессирующих или давно существующих и пассивных инфекций. Своевременное и качественное выявление возбудителя инфекции может предотвратить серьезные последствия жизнедеятельности патологических организмов, и, конечно, необходимо серьезно подойти к выбору метода диагностики инфекционного заражения.

Недостатком этого метода является то, что невозможно оценить так называемые структурные аберрации, т.е. изменения в структуре хромосом, как видно, когда весь кариотип. Классический экзамен - это визуальный анализ фетальных клеток - амниоцитов, которые дадут точную картину генетического оборудования неродившегося ребенка. Полученные амниоциты культивируют, то есть им дают возможность расти за счет роста. Время ожидания результатов варьируется в зависимости от скорости пролиферации клеток в культуре, обычно занимает около 10 дней, а иногда и дольше.

Гинекология к настоящему времени далеко продвинулась в способах эффективного диагностирования инфицирования пациентов, а также определения источника половой инфекции. И одним из действенных методов является анализ полимерной цепной реакции (ПЦР).

Что такое ПЦР в гинекологии?

ПЦР – это анализ, применяемый в гинекологии, который позволяет определить наличие инфекции и ее возбудителя с точностью, близкой к 100%.

Право ожидать результатов, а также труд, является самым большим недостатком этого метода. Нормальный хромосомный плод. Исследования молекулярной биологии - это новейшая и динамично развивающаяся область лабораторных исследований. Проще говоря, исследование такого типа связано с обнаружением специфического генетического материала в образце. Поиск генетического кода может быть, например.

Преимущества диагностики молекулярной биологии. Уверенность. В 10% вирусных носителей нет антител, несмотря на то, что инфекция и инфекция не могут быть обнаружены иммунологическими методами. В случае исследований молекулярной биологии инфекция будет диагностирована правильно. Наличие антител не всегда указывает на существующую инфекцию - антитела могут появляться после вакцинации или оставаться в организме через много лет после того, как патоген был устранен. Исследование молекулярной биологии обнаруживает сам патоген, а не антитело. Количественный анализ.

Что входит в анализ ПЦР? Метод предполагает выявление признаков ДНК возбудителя в биологическом материале – крови, моче, соскобе со слизистых. Как только обнаружена патологическая ДНК, происходит ее умножение в несколько раз, пока количества ДНК не будет достаточно для точного выявления возбудителя инфекции.

Что показывает анализ ПЦР?

ПЦР дает возможность быстро и с высокой точностью узнать о наличии инфекции и ее возбудителя в исследуемых тканях, а также диагностировать не только болезни на стадии обострения или остро протекающие, но и вялотекущие или .

Определение количества копий возбудителя в извлекаемом материале. Способность контролировать ход лечения; снизить стоимость лечения. . Его высокая чувствительность гарантирует четкий результат. Инфекция этой бактерией может быть бессимптомной или вызывать много серьезных заболеваний. Высокая чувствительность этого метода гарантирует четкий результат.

Исследование позволяет не только выявить, но и идентифицировать восемнадцать типов вирусов с низким, средним и высоким уровнем риска. Этот тест должен быть выполнен в качестве первичного теста у 30-летних и пожилых женщин. Цитогенетическое исследование является основой для диагностики заболеваний и клинических синдромов, обусловленных хромосомными аберрациями. Эти аберрации могут влиять как на половые хромосомы, так и на аутосомы. В исследовании представлена ​​информация о количестве и структуре хромосом на уровне их микроскопического анализа.

Какой метод обследования лучше: ПЦР или ИФА (иммуноферментный анализ)?

Анализ ИФА указывает на реакцию иммунитета к тому или иному возбудителю, что дает право предполагать наличие инфекции. Однако данный метод имеет большой процент погрешности, обусловленный индивидуальностью иммунных систем пациентов и способностью возбудителей вызывать реакцию иммунной системы в различных условиях. Из-за особенностей иммунной системы результаты исследований могут показывать как ложно-положительный результат, так и отрицательный. С такими показателями чувствительности метод ИФА значительно проигрывает ПЦР. Однако, эти способы диагностики могут отлично дополнять друг друга, что еще больше повысит точность обследования и поможет выбрать самый оптимальный комплекс лечения инфекции.

Поиск типичных изменений в кариотипе клеток, взятых у пациента, полезен для дифференциации заболевания и подтверждает их признание. Это также позволяет идентифицировать генетический риск семьи. Цитогенетическое исследование проводится из цельной крови, собранной в литиевую трубку гепарина. Этот тест следует проводить по крайней мере через неделю после отмены антибиотиков и стероидов.

Полное предложение молекулярной биологии

Установление отцовства и родства

Вариант 16 локусов Вариант 16 генетический профиль локусов. . Качественный тест - заключается в подтверждении или исключении наличия возбудителя в исследуемом образце. Исследования молекулярной биологии позволяют обнаруживать очень маленькие количества, такие как отдельные копии вируса.

В гинекологии, для того чтобы сделать определенные исследования используются самые разнообразные методики, одной из которых является мазок на ПЦР (ПЦР - полимеразная цепная реакция). Мазок представляет собой метод исследования, с помощью которого доктор берет небольшое количество биологического материала с поверхности слизистой. Этот метода дает возможность обнаружить различные инфекции в организме, которые первое время никак о себе не сигнализируют.

Количественный тест - позволяет определить количество возбудителя в вашем образце. Наиболее часто используется для мониторинга лечения вирусных заболеваний. Уменьшение количества копий вируса подтверждает успех терапии. Генотипирование - определение типа вируса.

Загружаемые наборы подробных инструкций по загрузке, хранению и транспортировке материала. Крови или сыворотки, в зависимости от типа тампона. . Эти вирусы можно разделить на две группы. Тестовый материал берется из мочеполового тракта. Этот тест позволяет диагностировать только слизистые поражения рта и горла.

Данный вид анализа берется в цервикальном канале или слизистой влагалища. Мазок на ПЦР может обнаружить возбудителей инфекции или болезни, основываясь на их генетический материал ДНК.

Как проводят анализ на ПЦР?

Полуженный мазок помещают в специальный реактор, в этом биологическом материале могут присутствовать определенные части ДНК возбудителя инфекции. К взятому образцу добавляются специальные ферменты, которые способны связаться с ДНК микроорганизма а также возобновить его копию. Эта реакция проходит по принципу цепной и после нескольких циклов ее повторения образуется достаточное количество копий, которые можно сравнить с имеющейся в базе информацией о ДНК микроорганизмов. Мазок на ПЦР взятый у женщин позволяет также установить то количество микробов, которое присутствует в организме женщины.

Получение материала для женщин ничем не отличается от стандартной цитологии. Вам нужна только одна загрузка за посещение. В случае мужчин, вы можете выполнить тест самостоятельно, хотя мы рекомендуем специалисту загружать материал. Комплект для загрузки также можно приобрести в Интернете. В комплект также входят инструкции по эксплуатации.

Папилломавирус человека передается при контакте с эпидермисом, который также проходит через все половые контакты. В результате инфекции могут образовываться так называемые. «Пыль» или бородавки. Однако инфекция, в зависимости от иммунитета инфицированного человека, может быть бессимптомной, субклинической или клинической. Особенно опасны бессимптомные и субклинические состояния, так как вирус передается другим партнерам без знания инфицированного человека.

Такая методика помогает с точностью выбрать метод лечения, а также отследить его эффективность.

Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?

В организме может присутствовать большое количество возбудителей инфекций, сюда относятся и «скрытые», которые длительное время никак себя не проявляют.

Анализ мазка на ПЦР позволяет выявить такие инфекции:

Вирус папилломы человека является причиной бородавок в коже, но также и на уровне гениталий. Их называют общими червями, посадки. Эти поражения кожи не являются раковыми, поэтому у них есть только эстетика. Нет лечения для лечения образований на коже. В большинстве случаев бородавки исчезают сами по себе, чтобы прервать их кровоснабжение. Однако дерматолог может устранить их с помощью лазера, и поэтому эстетическая проблема исчезает. Но есть сексуально передаваемые штаммы. Эти штаммы, называемые онкогенами, «предпочитают» женский половой аппарат, а точнее шейку матки.

• хламидиоз половых путей;
• гепатит;
• уреплазмоз половых органов;
• кандидоз (молочница);
• микоплазмоз;
• бактериальный вагиноз;
• инфекционный мононуклеоз;
• трихомониаз;
• папиллома вирусная инфекция;
• герпес;
• СПИД (ВИЧ);
• наличие раковых клеток;
• оценить гормональное состояние;

Как берется мазок у женщин?

Для того чтобы взять мазок на ПЦР используют различные биологические материалы (это может быть кровь, слюна, выделения из половых органов, моча). В лабораторных условиях у женщин берется мазок из влагалищной микрофлоры, шейки матки или матки. Мазок берут:

Это может быть половой акт, оральный, анальный. Он также передается без проникновения, если кожа партнеров не находится в непосредственном контакте. Из-за легкости, которую вы можете предпринять, вы также можете заразить себя, если используете интимное белье другого человека или других личных вещей. Но эта информация не является достоверной, есть только подозрения.

Этот вирус опасен, когда он кантонируется в женском половом аппарате. Присутствие или отсутствие вируса можно определить после приема секрета от гинеколога. Этот образец, собранный врачом, будет отправлен в лабораторию и по методу молекулярной биологии идентифицирован вирус.

• у женщин, которые имели незащищенный половой контакт,
• которые никогда не обследовались,
• у женщин, которые планируют забеременеть.

Показаниями к проведению мазка на ПЦР являются следующие:

• выявление причин бесплодия;
• наличие ИППП в острой фазе;
• тяжело протекающая беременность;
• предположение, что ИППП переходит в хроническую стадию;
• в случае, когда нужно выявить устойчивость вируса к определенному виду антибиотиков.

Во взятый материал добавляют необходимые реактивы, после чего идентифицируют возбудителей или заболевание. Процедура по взятию материала длиться не более 5 минут, она абсолютно безболезненная, а ее результат можно будет узнать уже через 2-4 дня. По его результатам назначают лечение.

Тест говорит, присутствует ли вирус в шейке матки, а не в каком количестве. Если обнаружено онкогенное напряжение, вы должны чаще контролировать его. Это означает, что вы можете повторять мазок Папаниколау каждые 3 или 6 месяцев. Таким образом, врач может обнаружить клеточные травмы на ранней стадии. В некоторых условиях тест может быть ложно отрицательным. Во-первых, если это было небольшое количество вирусов. Есть еще проблемы, когда цервикальные клетки не собираются должным образом или когда в образце содержится кровь.

После установки в шейку матки вирус попадает в клетки. Он взаимодействует с генетическим устройством и заставляет клетки поставлять белки, чтобы размножать его неограниченно. Со временем клетка разрушается, и это также происходит при мазка Папаниколау, но также в кольпоскопии или анатомопатологическом исследовании.

О чем нужно знать женщине, перед тем как сдавать мазок на ПЦР?

Перед проведение исследования женщине необходимо подготовиться. Уже за месяц перед планируемым анализом необходимо прекратить употребление всех лекарственных препаратов и лечебных процедур.

Стоит учесть, что анализ берётся перед менструацией, либо через 1-4 дня после ее окончания. За 3-4 дня перед анализом необходимо воздержаться от интимных отношений. Обычно материалы берут в тех ситуациях, когда вирус переходит в стадию обострения.

Установлена ​​так называемая дисплазия. Это означает, что геном клетки изменен и один шаг к превращению в рак. Без медицинского вмешательства клетки могут стать злокачественными. Так почему заболеваемость раком не составляет 80%? Потому что иммунная система способна уничтожать вирус. Для женщин, которые не преодолевают вирус, рак не возникает внезапно. Во-первых, видимое клеточное воспаление наблюдается как в мазке, так и в кольпоскопии.

Если у вас уже есть травмы, они возбуждаются, и вы не получаете рак. Правильный протокол отслеживания. Если травм нет, вы будете повторять экзамены каждые 6 месяцев. И если нет травм через 2 года, вы будете делать, как и любую другую здоровую женщину, мазок Папаниколау один раз в год.

Отличительные характеристики анализа на ПЦР:

• высокая точность определения типа инфекции;
• для выявления возбудителя достаточно даже 1 его клетки;
• возможность выявить возбудителя в любой жидкой среде;
• достаточно большая скорость определения результатов;
• дает возможность выявить вирус, а не продукты его жизнедеятельности или антитела;
• метод, который с точностью позволяет выявить некоторые виды инфекций.

В сравнении с другими методами исследований данная методика намного меньше дает ложноотрицательные результаты (показывает, что инфекции нет, в то время как она присутствует на самом деле), и с точностью в 99,9% не дает ложно - положительные результаты (присутствие инфекции тогда, когда ее на самом деле нет)

Против рака шейки матки. В отличие от подавляющего большинства онкологических заболеваний, рак шейки матки можно эффективно преодолеть. Простой мазок Папаниколау, таким образом, сигнализирует о предраковых поражениях, поэтому они не являются раком. К ним будут относиться справедливо. Еще одна важная информация, которая поможет вам бояться раз в год у врача для теста на Пап, заключается в том, что предраковые поражения развивались в течение многих лет.

Это связано с тем, что рак шейки матки может произойти в любом случае, даже если у вас есть или нет вирус, по сути, онкогенные штаммы. Тестирование не выполняется во время менструации, потому что результат может быть ложным. Пузырь должен быть опустошен непосредственно перед тестом, для лучшего обследования. Отбор проб не является болезненным для пациента, но похож на выборку для мазка Папаниколау. Вы получите результаты в течение 7 дней. Это дает вам информацию о наличии или отсутствии вируса, а не о наличии рака шейки матки.

Как понять результаты исследования?

Мазок на ПЦР может иметь отрицательный либо позитивный результат.

Позитивный результат свидетельствует о том, что в собранном биологическом материале имеются следы инфекции, а также скачен какие именно.

Отрицательный результат - имеет противоположное значение, и означает что в ходе исследования следов инфекции в материале не обнаружено.

У вас есть беспорядочный образ жизни? Этот анализ показывает уровень воспалительных процессов в организме. Кроме того, тест может делать прогнозы о риске инфаркта миокарда. Реактивный С-белок синтезируется в печени, и его значение может быть подтверждено простым анализом крови. И повышенные уровни этого маркера могут указывать на присутствие в организме проблем со здоровьем.

«Если человек замедляет повторные повышенные значения, помимо подозрения на инфекцию, травму, этот пациент нуждается в мониторинге», - говорит доктор Кристина Войнеа, старший врач лаборатории. Это наряду с курением, ожирением, высоким уровнем холестерина и генетическим наследованием. «Эти факторы риска, как мы говорим, в том числе реактивный белок, являются менее значимыми факторами, но присоединяйтесь к тем, кто называет их классикой, сильнее и оценивают общий риск пациента», - говорит д-р Вирджил Петреску, первичный кардиолог.

Мазок на ПЦР и беременность

Если так получилось, что данный вид анализа будущей маме сдавать не приходилось, то его берут уже у беременной женщины, так как это исследование помогает выявить скрытые инфекции, которые могут передаваться половым путем, а также другие скрытые инфекции, которые длительное время не проявляют себя. Они очень могут навредить малышу, или провести к выкидышу, внутриутробным инфекциям или преждевременным родам. Именно поэтому делать данный анализ лучше перед беременностью, во время ее планирования, чтобы не причинить вред ребеночку. Но если вышло, что женщина уже беременна, не стоит бояться сдавать анализ, так как его проведение на ребеночка не влияет. Все материалы берутся с поверхности шейки матки или цервикального канала.

«Если значения сохраняются постоянными, в зависимости от этого значения, пациент сможет быть в определенном классе риска сердечно-сосудистых заболеваний», - говорит доктор Кристина Воинеа, старший врач лаборатории. Не ясно, вредит ли С-реактивный белок. Кажется, она может это сделать, активируя определенные элементы в стенке кровеносного сосуда, или это является признаком проблемы в других местах, - говорит доктор Вирджил Петреску, первичный кардиолог.

Статистически, однако, было продемонстрировано, что люди, которые имеют нормальные значения этого маркера, попадают в класс высокого риска. «Пациенты с высокой реакционной способностью к нормальному нормальному белку имеют более высокий риск развития проблем с коронарной артерией - сердечный приступ или инсульт», - говорит доктор Вирджил Петреску, кардиолог.

Please enable JavaScript to view the

heame.ru

Когда назначается и что показывает исследование мазка у женщин

Для прочтения нужно: 3 мин.

Мазок на заболевания урогенитальной сферы — один из самых распространенных и информативных методов анализа в современной медицине. С его помощью можно выявить не только банальные воспаления, но и предупредить развитие онкологических заболеваний. Несмотря на надежность и доступность метода, не все женщины осознают необходимость регулярного посещения гинеколога и сдачи анализов и нередко обращаются к врачу только в запущенных случаях.

Показания к назначению анализа мазка у женщин

Каждая женщина хоть раз в своей жизни, посещая гинеколога, сдавала мазок на микрофлору или скрытые инфекции. Мазок берется со стенок влагалища, цервикального канала и шейки матки. В лабораторных условиях проводится микроскопическое исследование клеток, содержащихся в биологическом материале. Такой анализ позволяет оценить состояние эпителиальных клеток матки и влагалища, выявить патогенные микроорганизмы и заболевания, передающиеся половым путем. Мазок желательно сдавать регулярно, раз в год, даже если у женщины нет видимых поводов для беспокойства, поскольку многие инфекции в течение длительного времени могут не вызывать никаких симптомов.

В обязательном порядке назначается мазок в тех случаях, когда женщина жалуется на зуд и жжение в области половых органов, необычные выделения из них, внезапную боль внизу живота. Как правило, эти признаки указывают на наличие какого-либо заболевания, диагностировать которое можно только с помощью анализа мазка. Кроме того, желательно провести исследование биоматериала в том случае, если у женщины произошел незащищенный контакт с малоизвестным ей партнером и есть риск заразиться инфекционным заболеванием, передающимся половым путем.

Также врач-гинеколог назначает обязательную сдачу анализа мазка женщинам, планирующим беременность, готовящимся к ЭКО или другим процедурам искусственного оплодотворения (ВРТ). Женщинам, ожидающим ребенка, анализ мазка проводится трижды на всем протяжении срока, поскольку инфекции способны передаваться от матери к ребенку, осложнять роды или вызывать выкидыш.

Типы анализов мазка

В гинекологии существует несколько типов анализа мазка в зависимости от вида исследования.

1. Самым распространенным является мазок на флору или общий мазок , при помощи которого врач определяет так называемую чистоту влагалища у женщины. Что он показывает? Этим способом можно определить состояние клеток эпителия и выявить наличие заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, таких как вагинит, кандидоз (молочница), вагиноз, цервицит. В результате проведения бактериоскопического исследования также диагностируются некоторые заболевания, передающиеся половым путем — гонорея, трихомониаз. В основе анализа лежит способность разных микроорганизмов окрашиваться в разные цвета в зависимости от степени устойчивости к воздействию антибиотиков. Эта способность была открыта датским ученым Г.К. Грамом. В результате окрашивания биоматериала выявляются грамположительные (грам+) микроорганизмы, имеющие большую чувствительность к антибиотикам, и грамотрицательные (грам—), отличающиеся более тонкой и сложной в строении оболочкой и низкой чувствительностью к препаратам. Грамотрицательные микроорганизмы способны вызвать различные заболевания женской половой сферы.

   Врач-лаборант в процессе проведения анализа под микроскопом подсчитывает количество по-разному окрашенных микроорганизмов, лейкоцитов, определяет форму бактерий, их размеры и расположение. В некоторых случаях исследуются неокрашенные (нативные) мазки, что позволяет обнаружить жгутиковые формы трихомонад. Кроме того, в рамках мазка на флору может проводиться так называемый посев на микрофлору. Он используется в тех случаях, когда возбудитель заболевания из-за его малой концентрации не может быть обнаружен под микроскопом и для определения рода и вида бактерий. В этом случае биоматериал, взятый из половых органов женщины, помещают в специальную питательную среду на основе желатина, и через определенное время изучают результат.

На заметку Длительность культивирования посева зависит от того, присутствие какого микроорганизма необходимо выявить. Дольше всего созревает посев при хламидиозе — 15 дней.

Появление на питательном субстрате колоний микроорганизмов говорит о наличии заболевания. Метод посева также используется для определения стратегии лечения, поскольку во время созревания колонии можно выяснить, к воздействию каких групп антибиотиков она особенно неустойчива.

1. Мазок на скрытые инфекции . К скрытым инфекциям относят группу болезней, которые могут бессимптомно протекать на протяжении нескольких месяцев или даже лет, вызывая осложнения, а некоторых случаях — даже бесплодие. На сегодняшний день наиболее достоверным способом выявления скрытых инфекций является исследование мазка при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции). Этот метод используется для диагностики инфекций, не обнаруживаемых в общих мазках. Для проведения анализа берется секрет из шейки матки, влагалища или мочеиспускательного канала и производится многоэтапное повышение концентрации нуклеиновой кислоты и копирование отдельных фрагментов ДНК присутствующих в мазке микроорганизмов. В результате врач может установить видовую и родовую принадлежность всех патогенных бактерий и их способность вызывать развитие заболеваний. В большинстве случаев ПЦР-анализ применятся при подозрении на наличие заболеваний, передающихся половым путем и имеющих на ранних стадиях практически бессимптомное течение. Преимуществами метода являются:

• высокая точность определения возбудителя инфекции;
• возможность определения именно наличия вируса, а не продуктов его жизнедеятельности или распада;
• возможность постановки точного диагноза на основе всего одной клетки микроорганизма.

Важно! Метод ПЦР не выдает ложноположительных результатов, иными словами, положительных проб там, где отсутствует инфекция, не бывает.

1. Мазок на онкоцитологию, или тест по Папаниколау (пап-тест) , позволяет выявить наличие онкологических заболеваний в шейке матки на ранних стадиях и вовремя начать терапию. Пап-тест определяет большинство воспалительных заболеваний, дисплазию эпителия и злокачественные образования. Сдавать этот мазок рекомендуется ежегодно всем женщинам в возрасте от 21 до 65 лет. В случае если у женщины наблюдаются нарушения менструального цикла, воспалительные процессы цервикального канала, бесплодие, врач назначит мазок на онкоцитологию в обязательном порядке. Также рекомендуется пройти пап-тест при диагностировании диабета, ожирения 2–3 степени, в период планирования беременности, при приеме гормоносодержщих препаратов и наличии в организме вирусов генитального герпеса и папилломы. При анализе мазка можно получить пять типов результата в зависимости от наличия и степени патологии. Первый тип — это отрицательный показатель, говорящий о том, что никаких отклонений от нормы в организме женщины нет, и она полностью здорова. При втором типе присутствует воспалительное заболевание, требующее лечения. Третий тип свидетельствует о наличии в эпителии единичных клеток с аномальным строением ядра. Четвертый тип — подозрение на злокачественное образование или эрозию шейки матки, генитальный герпес, папиллломовирусную инфекцию, паракератоз. Пятый тип — наличие онкологического заболевания, требующего незамедлительного лечения. Следует помнить, что мазок показывает только степень изменения клеток, но не причину, их вызвавшую. Для постановки диагноза необходимы результаты других анализов, включая биопсию, кольпоскопию и гистологическое исследование. Если в мазке будут найдены атипичные клетки, то в заключении будет об этом написано, а также будет указан тип изменений. Если в расшифровке мазка на цитологию нет особых примечаний, это говорит о том, что в ходе исследования никаких патологий обнаружено не было.

Подготовка к исследованию

При выборе дня для взятия мазка нужно учитывать менструальный цикл. Желательно сдавать анализ перед началом менструации или через несколько дней после ее окончания (оптимальный срок — пятый день), чтобы избежать попадания крови в мазок. Хотя процедура взятия мазка и не слишком сложна, все же необходимо заранее принять некоторые дополнительные меры, чтобы обеспечить чистоту результата. Подготовка к мазку на инфекции у женщин заключается в следующем:

1. Не использовать вагинальные свечи, тампоны, мази перед анализом.
2. Отказаться от спринцевания.
3. При наличии воспалительного заболевания, сопровождающегося обильным выделением секрета необходимо сначала провести лечение и только после полного выздоровления сдавать мазок.
4. Воздержаться от половых контактов в течение одного-двух дней до сдачи анализа.
5. Не использовать средства интимной гигиены накануне и в день процедуры.
6. Воздержаться от опорожнения мочевого пузыря в ближайшее время перед сдачей мазка.

В остальном женщина может вести обычный образ жизни: не требуется ограничений ни по питанию, ни по физической активности.

Как берут мазок у женщин

Взятие у женщины мазка на флору, на скрытые инфекции и на онкоцитологию несколько различается. Во всех случаях перед процедурой женщина проходит общий гинекологический осмотр на кресле с помощью зеркала.

При мазке на флору после визуальной оценки стенок влагалища врач специальным стерильным шпателем осуществляет забор материала из трех участков — влагалища, шейки матки и наружного отверстия мочеиспускательного канала. В некоторых случаях забор производится только с двух первых участков. Взятый шпателем материал равномерно широким мазком распределяется по стерильному предметному стеклу. Нанесение материала каплей, толстым слоем или небольшим мазком считается неправильным, поскольку затрудняет работу врача-лаборанта. При этом материалы из разных участков должны наносится на стекло отдельно друг от друга. С обратной стороны стекла врач делает пометки о месте взятия мазка: U — мочеиспускательный канал, V — влагалище, С — шейка матки. После этого стекло высушивается и направляется в лабораторию на исследование.

При сдаче мазка у женщин на скрытые инфекции и на онкоцитологию забор материала производится специальной щеточкой или с помощью особых стерильных ватных тампонов. Перед взятием материала обязательно удаляют слизь, так как ее наличие может дать ложный результат. Поскольку большинство микроорганизмов являются внутриклеточными паразитами, точное обнаружение их возможно только при исследовании соскоба со стенок половых органов. При анализе на скрытые инфекции материал со щеточки помещают в физраствор, хранящийся в холодильнике. Мазок на онкоцитологию наносят на предметное стекло и высушивают.

Как правило, процедура забора мазка для женщины практически безболезненна. Неудобство может вызывать соприкосновение с гинекологическим зеркалом из-за разницы температур между телом и металлическим инструментом. При взятии материала тампоном или щеточкой с шейки матки может отмечаться незначительное болевое ощущение, которое проходит сразу после окончания манипуляции. Мазок на онкоцитологию иногда способен вызывать незначительные кровянистые выделения в течение двух-трех дней. Если возникают сильные кровотечения, повышение температуры, боли в животе, то необходимо срочно обратиться к гинекологу, поскольку такие симптомы при взятии мазка нормой не являются.

Что показывает анализ мазка у женщин: интерпретация результатов

После проведения анализа мазка пациентка получает результаты, которые полностью зависят от типа, назначенного ей исследования.

При расшифровке анализа мазка на флору необходимо знать показатели нормы:

1. Плоский эпителий (пл.эп) — у здоровой женщины этот показатель не должен превышать 15 клеток в поле зрения. Большее их количество говорит о воспалительном процессе, а меньшее — о наличии гормональных нарушений.
2. Лейкоциты (L) . Нормальное количество во влагалище — не более 10-ти, а в шейке матки не более 30-ти единиц.
3. Палочки Дедерлейна , обеспечивающие нормальную микрофлору женских половых органов. В мазке здоровой женщины они должны присутствовать в большом количестве, поскольку их недостаток свидетельствует о нарушенной микрофлоре влагалища.
4. Слизь должна присутствовать в мазке в умеренном количестве. Обильные выделения слизи — признак воспаления или инфекции.
5. Грибки рода кандида, гонококки, трихомонады в мазке выявляться не должны. Их наличие свидетельствует о заболевании.

Кроме этих показателей в анализе может быть указана одна из четырех степеней чистоты влагалища. Нормальными являются только первая и вторая степень, третья и четвертая являются признаком заболевания половых путей.

Результаты анализа мазка на скрытые инфекции можно получить через 1–2 суток после сдачи. В некоторых случаях они могут быть готовы прямо в день прохождения процедуры. При помощи мазка выявляются следующие инфекции:

• герпес-вирус человека 1 и 2 типов;
• вирус Эпштейна-Барр;
• цитомегаловирус;
• герпес-вирус человека;
• вирус папилломы человека;
• бледная трепонема;
• мобилункус;
• бактероиды;
• гонококк;
• гарднерелла;
• микоплазма;
• уреаплазма;
• хламидии.

Важно! Интерпретировать анализ мазка на скрытые инфекции несложно, обычно напротив наименования той или иной инфекции просто указывается результат — положительный или отрицательный. Тем не менее расшифровку любого анализа и назначение лечения должен делать только лечащий врач, инициатива пациента в этом случае недопустима.

Мазок на инфекции в большинстве случаев является достаточно надежной диагностической процедурой. С его помощью можно выявить большинство серьезных заболеваний половой сферы, при этом стоимость анализа является вполне доступной даже в частных клиниках.

www.kp.ru

ПЦР у женщин

В этой статье Вы узнаете, как берут ПЦР у женщин,  как проводится подготовка к ПЦР женщине, и что такое ПЦР тестирование у женщин.

Вы узнаете, как берут кровь на ПЦР у женщин, и, на какие инфекции проверяют мазок.

ПЦР (полимеразная цепная реакция) у женщин позволяет выявить заболевания, передаваемые половым путем.

С целью обследования методом ПЦР берется мазок из влагалища, шейки матки и цервикального канала у женщин.

Также при необходимости исследуют мазок со слизистой ротовой полости, анального отверстия, мочу, кровь.

На какие инфекции смотрят кровь ПЦР у женщин

Что представляет собой ПЦР?

В специальный аппарат помещают биоматериал, а именно мазки со слизистых оболочек.

Добавляется фермент, который помогает синтезировать копию генетического материала микроорганизма (ДНК или РНК) в несколько этапов.

Результат сравнивают с так называемыми эталонами - существующей информацией о ДНК или РНК известных бактерий и вирусных частиц.

Как берут мазки для ПЦР у женщин?

Мазок берет венеролог или врач-гинеколог, с помощью специального деревянного шпателя, из наружного отверстия уретры, шейки матки и влагалища.

Забор материала - процедура безболезненная и вполне безопасная, осуществляется с помощью стерильного одноразового материала.

kvd-moskva.ru

---

Смотрите также

• 
  Чабрец уход и выращивание
• 
  Что за лекарство элевит
• 
  Ренгалин при беременности
• 
  Ребенок 4 года голова болит
• 
  Панкреатит симптомы и лечение у взрослых препараты диета
• 
  От эрозии желудка лекарства
• 
  Прием кардиомагнила утром или вечером
• 
  Доброкачественная опухоль щитовидной железы
• 
  Ксеомин фото до и после
• 
  Всегда ли при беременности бывает имплантационное кровотечение
• 
  Еда при диабете 2 типа